Pseudomonas Agar Base, pożywka sypka

PODSTAWA AGAROWA PSEUDOMONAS

Kod: CM0559

Do selektywnej izolacji gatunków Pseudomonas po uzupełnieniu SR0102 lub SR0103.

Typowa formuła * gm / litr

Pepton żelatynowy 16,0

Hydrolizat kazeiny 10,0

Siarczan potasu 10,0

Chlorek magnezu 1.4

Agar 11,0

pH 7,1 ± 0,2 w 25 ° C

 * Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
PSEUDOMONAS CN SELEKTYWNY SUPLEMENT

Kod: SR0102

Zawartość fiolki (każda fiolka wystarcza na 500 ml pożywki)

na fiolkę
na litr
Cetrimid

100,0 mg

200,0 mg
Nalidyksian sodu

7,5 mg

15,0 mg

PSEUDOMONAS CFC SELEKTYWNY SUPLEMENT AGAROWY

Kod: SR0103

Zawartość fiolki (każda fiolka wystarcza na 500 ml pożywki)

na fiolkę
na litr
Cetrimid

5,0 mg

10,0 mg
Fucidin

5,0 mg

10,0 mg
Cefalosporyna

25,0 mg

50,0 mg

Sposób użycia 
Aby przygotować bazę agarową
Zawiesić 24,2 g bazy agarowej w 500 ml wody destylowanej. Dodaj 5 ml glicerolu. Doprowadzić do wrzenia do całkowitego rozpuszczenia, sterylizować w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Pozwól medium ostygnąć do 50 ° C.
Aby przygotować agar Pseudomonas CN
Do 500 ml bazy agarowej schłodzonej do 50 ° C dodać zawartość 1 fiolki suplementu Pseudomonas CN (SR0102) ponownie uwodnionego zgodnie z zaleceniami. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego.
Aby przygotować agar Pseudomonas CFC
Do 500 ml bazy agarowej schłodzonej do 50 ° C dodać zawartość 1 fiolki suplementu Pseudomonas CFC (SR0103) ponownie uwodnionego zgodnie z zaleceniami. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego.

Opis
Baza agarowa Pseudomonas została zaprojektowana w taki sposób, że poprzez dodanie odpowiedniego suplementu (SR0102 lub SR0103) podłoże staje się selektywne dla Pseudomonas aeruginosa lub Pseudomonas spp. ogólnie. Podłoże podstawowe jest modyfikacją podłoża King's A Medium1, w którym występuje chlorek magnezu i siarczan potasu w celu zwiększenia produkcji pigmentu.

Suplement Pseudomonas CN (SR0102) jest zalecany do selektywnej izolacji Pseudomonas aeruginosa. Formułę suplementu opisali Goto i Enomoto2 po wykazaniu cetrimidu jako środka selektywnego przez Lowbury i Collins3. Goto i Enomoto wykazali, że dodanie kwasu nalidyksowego w ilości 15 µg / ml, przy jednoczesnym zmniejszeniu zawartości cetrimidu do 200 mg, poprawiło wydajność. Pożywka zapewniała lepsze odzyskiwanie Pseudomonas aeruginosa ze zwiększonym tworzeniem pigmentu, jednocześnie silnie hamując Klebsiella, Proteus i Providencia spp., Przy czym te ostatnie organizmy stanowią kłopotliwe zanieczyszczenia konwencjonalnych mediów cetrimidowych.

Pseudomonas CFC Suplement (SR0103) jest zalecany do selektywnej izolacji Pseudomonas spp. ogólnie. Mead i Adams4 wykazali, że obniżenie zawartości cetrimidu do 10 mg / ml pozwoliło na wzrost wszystkich pigmentowanych i niepigmentowanych psychofilowych pseudomonad. Aby poprawić jego selektywne działanie, dodali cefalorydynę 50 ug / ml) i fucydynę (10 ug / ml). Ta kombinacja środków dała nowe i bardziej specyficzne podłoże do izolacji pseudomonad z chłodzonej żywności i zakładów przetwórczych. Inkubację należy prowadzić w temperaturze 25–30 ° C przez 48 godzin.

Dużą wagę przywiązuje się do wykrywania Burkholderia cepacia (wcześniej Pseudomonas cepacia) w systemach wodnych, szczególnie tam, gdzie woda ma być używana do przygotowywania farmaceutyków i kosmetyków5. Organizm jest odporny na wiele powszechnie stosowanych środków dezynfekujących. Burkholderia cepacia stała się ważnym patogenem oportunistycznym w zakażeniach dróg moczowych, brzucha, dróg oddechowych i innych.

Charakterystyka wzrostu gatunków Pseudomonas na podłożu agarowym Oxoid Pseudomonas z suplementami.

Gatunki Pseudomonas

Kwota wzrostu w suplemencie CN (SR0102)

Wielkość wzrostu w suplemencie CFC (SR0103)

Burkholderia cepacia ATCC® 17759


Burkholderia cepacia ATCC® 25416



Pseudomonas aeruginosa



Pseudomonas putida

Pseudomonas fluorescens


Inkubację przeprowadzono w 30 ° C i płytki odczytano po 18 godzinach inkubacji.

Technika
Próbki kliniczne do badań Pseudomonas aeruginosa
1. Przygotuj Pseudomonas CN Medium zgodnie z instrukcją.
2. Wlać płytki i osuszyć powierzchnię.
3. Przetrzyj dużą inokulum ponad połowę powierzchni płytki.
4. Używając jałowej pętli, posmaruj inokulum pozostałą częścią płytki, aby uzyskać izolowane kolonie.
5. Inkubuj w temperaturze 35 ° C i badaj po 24 i 48 godzinach, używając zarówno światła białego, jak i ultrafioletowego.

Próbki żywności, wody i środowiska dla pseudomonad
1. Przygotuj Pseudomonas CFC Medium zgodnie z instrukcją.
2. Wlać płytki i osuszyć powierzchnię.
3. Przygotuj próbki żywności, rozcieńczając 1 na 5 lub 1 na 10 1% (wag./obj.) Sterylną wodą peptonową (CM0009) i homogenizuj w „Stomacher” lub laboratoryjnym blenderze.
4. Odmierzyć pipetą 0,5 lub 1 ml homogenatu na płytkę i rozprowadzić na powierzchni za pomocą sterylnego szklanego rozpylacza. Zaszczepić próbki wody i wymazów bezpośrednio na powierzchni podłoża.
5. Inkubuj w 25 ° C i badaj po 24 i 48 godzinach, używając zarówno światła białego, jak i ultrafioletowego.

Wygląd kolonialny
Wzrost na podłożu CN lub CFC jest zwykle ograniczony do Pseudomonas spp. ale niektórzy członkowie rodziny Enterobacteriaceae również mogą być obecni.