CAMPYLOBACTER SELEKTYWNY MEDIUM BEZ KRWI (ZMODYFIKOWANY CCDA-PRESTON)
Pożywkę, którą przygotowano z Campylobacter bezkrwawej bazy selektywnego agaru CM0739 i CCDA Selective Supplement SR0155, można zastosować do izolacji Campylobacter jejuni, Campylobacter coli i Campylobacter laridis.
PODSTAWA AGARA WYBIERAJĄCA KAMPYLOBAKTER
Kod: CM0739
Typowa formuła * gm / litr
Bulion odżywczy nr 2 25,0
Bakteriologiczny węgiel drzewny 4.0
Hydrolizat kazeiny 3.0
Dezoksycholan sodu 1.0
Siarczan żelazawy 0,25
Pirogronian sodu 0,25
Agar 12,0
pH 7,4 ± 0,2 w 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
WYBÓR SELEKTYWNY CCDA
Kod: SR0155
Ulepszony selektywny suplement do Campylobacter Selektywna agarowa baza bez krwi.
Zawartość fiolki (każda fiolka wystarcza na 500 ml pożywki)
na fiolkę
na litr
Cefoperazon
16mg
32mg
Amfoterycyna B.
5mg
10 mg
Sposób użycia
Zawiesić 22,75 g bezkrwawej bazy selektywnego agaru Campylobacter w 500 ml wody destylowanej i doprowadzić do wrzenia do rozpuszczenia. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Schłodzić do 50 ° C. Aseptycznie dodać 1 fiolkę CCDA Selective Supplement SR0155 odtworzoną zgodnie z instrukcją. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego.
Opis
Zmodyfikowane podłoże CCDA opiera się na oryginalnej formule opisanej przez Bolton i in. 1, która została opracowana w celu zastąpienia krwi węglem drzewnym, siarczanem żelazawym i pirogronianem sodu. Ulepszoną selektywność uzyskano, gdy cefazolin w oryginalnym preparacie zastąpiono cefoperazonem jako środkiem selekcyjnym 2. Nowsze prace wykazały, że można zwiększyć szybkość izolacji, jeśli płytki będą inkubowane w 37 ° C zamiast 42 ° C3.
Amfoterycyna B została dodana do formuły, aby zahamować wzrost drożdży i grzybów, które mogą wystąpić w 37 ° C.
Zmodyfikowana pożywka CCDA i pożywka Campy-BAP miały taką samą wydajność w procedurze szybkiego podnoszenia kolonii do wykrywania termofilnych postaci kampylowych, w których błony są blotowane na hodowlach agarowych, a następnie poddawane testowi immunologicznemu 5.
W badaniu zdrowych szczeniąt i kociąt do przewozu gatunków Campylobacter 6 stwierdzono, że zmodyfikowana pożywka CCDA jest odpowiednią pożywką i bardziej produktywną dla Campylobacter upsaliensis w tym zastosowaniu niż pożywka CAT. Zmodyfikowane podłoże CCDA zostało potwierdzone jako odpowiednie do izolacji Campylobacter spp. z próbek nieklinicznych po wzbogaceniu w bulion Exeter7.
Zastosowanie podłoża bez krwi Campylobacter zostało określone przez brytyjskie Ministerstwo Rolnictwa, Rybołówstwa i Żywności (MAFF) w zatwierdzonej metodzie izolacji Campylobacter z żywności4.
Technika
1. Przygotuj bezkrwawy selektywny agar Campylobacter zgodnie z instrukcją.
2. Zemulguj około 0,5 g próbki w 5 ml sterylnej 0,1% wody peptonowej, aby uzyskać w przybliżeniu rozcieńczenie 1:10.
3. Zaszczepić na podłoże selektywne wacikami zakończonymi bawełną, aby powstały pojedyncze izolowane kolonie.
4. Inkubuj płytki w atmosferze składającej się z około 5-6% tlenu, 10% dwutlenku węgla i 84-85% azotu przez 48 godzin w 37 ° C.
Można to najlepiej osiągnąć, stosując zestaw do generowania gazu oksydowego dla Campylobacter (BR0056) w połączeniu ze słoikiem beztlenowym Oxoid (HP0011) i aktywnym katalizatorem (BR0042). W przypadku słoików o mniejszej pojemności AnaeroJar (2,5 litra) użyj zestawu do generowania gazu tlenkowego dla postaci Campylobacter (BR0060). Alternatywnie użyj CampyGen CN0025 lub CN0035, który nie wymaga użycia katalizatora ani dodatku wody.
Kolonialna morfologia znaków kampylowych może być wykorzystana jako wskazówka do identyfikacji na poziomie gatunku. Szczepy Campylobacter jejuni wytwarzają szare, wilgotne, płasko rozprzestrzeniające się kolonie. Niektóre odmiany mogą mieć zielony odcień lub wygląd suchy, z metalicznym połyskiem lub bez. Szczepy Campylobacter coli mają zazwyczaj kremowo-szary kolor, są wilgotne, lekko wypukłe i często wytwarzają odrębne kolonie.
Kolonie mają tendencję do roju, gdy początkowo są izolowane z próbek klinicznych.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przechowuj selektywny suplement w ciemności w temperaturze 2-8 ° C i użyj go przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowaną pożywkę można przechowywać do 2 tygodni w 2-8 ° C.
Wygląd
Medium odwodnione: czarny, sypki proszek
Przygotowane medium: czarny żel
