PODSTAWA AGAR KRWI KOLUMBII
Kod: CM0331
Pożywka uniwersalna odpowiednia do uprawy wybrednych organizmów.
Typowa formuła * gm / litr
Specjalny pepton 23,0
Skrobia 1.0
Chlorek sodu 5.0
Agar 10,0
pH 7,3 ± 0,2 @ 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Dodaj 39 g do 1 litra wody destylowanej. Zagotuj, aby całkowicie rozpuścić medium. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Ochłodzić do 50 ° C i dodać 5% sterylnej defibryfikowanej krwi.
Opis
Tradycyjnie, podłożami agarowymi z krwią były albo hydrolizat kazeiny, albo media do infuzji mięsa. Zaletą pierwszej jest szybka produkcja dużych kolonii, a drugiej - wyraźnie określonych stref hemolizy i dobrego różnicowania kolonii.
Baza Columbia Agar Base (CM0331) (Ellner i in. 1) łączy zalety obu tych rodzajów mediów, zapewniając lepszą wszechstronną wydajność.
Ta nowa baza wykazała wszechstronność i doskonałą wydajność w kilku aplikacjach.
Brucella
Aby przygotować selektywne podłoże, dodaj Brucella Selective Supplement SR0083 do 500 ml jałowej, stopionej bazy agarowej z krwią Columbia (CM0331), zawierającej 5-10% v / v inaktywowanej surowicy końskiej i 1% m / v dekstrozy2,3.
Campylobacter i Helicobacter
Aby przygotować selektywne medium, dodaj:
Campylobacter Selective Supplement (Skirrow) SR00694
lub Campylobacter Selective Supplement (Butzler) SR00855,6
lub zmodyfikowany suplement selektywny Butzlera (ISO) SR0214
lub Campylobacter Selective Supplement (Blaser-Wang) SR00987,8,9
lub suplement Helicobacter pylori SR0147 do 500 ml jałowej, stopionej bazy agarowej Columbia (CM0331) zawierającej suplement wzrostowy Campylobacter SR023210 i 5-7% v / v krwi konia lub owcy (SR0048, SR0050 lub SR0051).
Agar z emulsją żółtka jaja wytworzony przy użyciu bazy agarowej Oxoid Columbia (CM0331) i emulsji żółtka jaja SR0047 okazał się zadowalającym podłożem izolacyjnym dla Helicobacter pylori11.
Gram-dodatnie ziarniaki
patrz Staph / Strep Selective Supplement SR0070
patrz zmodyfikowany suplement selektywny CNA SR0176
patrz Streptococcus Selective Supplement SR0126
Gardnerella
patrz Gardnerella vaginalis Selektywny suplement SR0119
Inne aplikacje
Test Elek
Baza agarowa Columbia (CM0331) z dodatkiem sterylnej surowicy zapewnia wydajne podłoże do testowania wirulencji Corynebacterium diphtheriae. Po zastosowaniu ustalonej techniki linie wytrącania toksyny-antytoksyny są wyraźnie widoczne po 48 godzinach.
Test Naglera
Dodanie 5 ml ekstraktu Fildes SR0046 i 10 ml emulsji żółtka jaja SR0047 do 100 ml jałowej, stopionej bazy agaru z krwią Columbia (CM0331) zapewni podłoże diagnostyczne dla Clostridium perfringens, gdy jest stosowany z antytoksyną Clostridium perfringens (reakcja Naglera) i neomycyną (100 -125m / ml) 12.
Odwrócony test CAMP dla Clostridium perfringens
Odwrócony test CAMP13 jest wysoce czułym i specyficznym testem na Clostridium perfringens, który może być stosowany jako alternatywa dla testu Naglera.
Technika
Zaszczepić hodowlę podejrzaną o Clostridium perfringens w linii prostej w poprzek płytki agaru z krwią owczą Columbia. Posmaruj nocną (lub starszą) kulturę Streptococcus agalactiae, o której wiadomo, że wytwarza czynnik CAMP pod kątem prostym do pierwszej inokulacji, uważając, aby linie nie stykały się. Inkubować beztlenowo w temperaturze 35–37 ° C przez 18–24 godzin.
Pozytywny odwrotny test CAMP jest wskazany przez tworzenie się `` grotu strzały '' hemolizy między liniami wzrostu Clostridium perfringens i Streptococcus agalactiae.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane płytki z medium przechowuj w temperaturze 2–8 ° C.
Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek
Przygotowane medium: żel w kolorze słomy