Brucella Medium Base, pożywka sypka

BRUCELLA MEDIUM BASE

Kod: CM0169

Do przygotowania antybiotykowego z surowcami i dekstrozą do hodowli i izolacji Brucelli za pomoc Brucella Selektywny suplement SR0083 lub SR0209. Bez antybiotyków można przejść do korzystania z metody barwienia Cruickshanka do różnicowania szczepów.

Typowa formuła * gm / litr

Pepton 10,0

Proszek „Lab-Lemco” 5.0

Glukoza 10,0

Chlorek sodu 5.0

Agar 15,0

pH 7,5 ± 0,2 przy 25 ° C



* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia specyfikacji wydajności

Sposób użycia
Zawiesić 45 gw 1 ​​litrze wody destylowanej. Doprowadzić do wrzenia, aby całkowicie się rozpuścićły. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Ochłodzić do 50 ° C i dodać 5% inaktywowanej surowicy końskiej (tj. Surowicy końskiej utrzymywanej w 56 ° C przez 30 minut). Dobrze wymieszaj przed nalaniem.

WYBORCZE SUPLEMENTY BRUCELLA

Zawartość fiolki (każda fiolka wystarcza na 500 ml pożywki)
Kod: SR0083
Kod: SR0209
Polimyksyna B.

2500 IU
2500 IU
Bacitracin

12 500 IU
12 500 IU
Cykloheksimid

50 mg
Kwas nalidiksowy

2,5 mg
2,5 mg
Nystatyna

50000 IU
50000 IU
Wankomycyna
10 mg
10 mg
Natamycyna

25 mg
Kierunki
Uzupełnij suplement zgodnie z zaleceniami. Inkubować przez 10-15 minut w temperaturze 35 ° C. Dokładnie wymieszaj i natychmiast dodaj zawartość fiolki do 500 ml jałowej bazy tlenowej Brucella Medium Base, schłodzonej do 50 ° C razem z 5-10% obj./obj. Sterylnej inaktywowanej surowicy końskiej SR0035 i 1-5% wag./obj. Sterylizowana przez filtrację 10% roztwór dekstrozy. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego.

Opis
Pożywkę Brucella Base można użyć do przygotowania usługi antybiotykowej z surowicą-dekstrozą opisaną przez Jonesa i Brinley Morgan1 do hodowli i obsługi Brucelli, w tym wybrednych danych. Pożywka Brucella z antybiotykami ma przewagę nad pożywkami opisanymi przez Kuzdasa oraz Morse2 i Renoux3, ponieważ będzie to wymagało wzrostu wybrednych kategorii i jest bardziej skuteczne jako pożywka selektywna. Podczas badań Jones i Brinley Morgan wykazali, że agar z glukozą w surowicy z antybiotykami daje doskonały wzrost wszystkich szczepów Brucella i pozwala na lepszy wzrost biotypu 2 Brucella abortus - szczep, który był trudny lub niemożliwy do wzrostu.

Technika
Dodanie barwników (tj. Zieleni malachitowej i fiołka goryczki) jako środki selektywne nie są zalecane, ponieważ mogą powodować słaby wzrost wielu szczepów Brucella. Gdy wymagana jest nieselektywna pożywka, pożywka może być używana tylko z dostępnymi surowcami (tj. Bez antybiotyków): w celu późniejszego rozróżnienia między szczepami Brucella. Ten środek jest zalecany do stosowania w użyciu z metodą barwienia Cruickshanka 4:
1. Zaimpregnuj paski bibuły filtracyjnej 1: 200 Fuksyną podstawową lub 1: 600 Thioniną. Suchy
2. Umieścić paski równolegle na powierzchni agaru z surowicą i dekstrozą, a następnie przykryć cienką warstwą tego samego ograniczenia. Następnie pozwól medium zestalić się.
3. Wykonaj inokulację udarową szczepów Brucella, które mają być badane, pod kątem prostym do pasków.
4. Inkubuj w 10% dwutlenku węgla przez 2-3 dni w temperaturze 35 ° C.
5. Zbadaj. Odporne szczepy rosną wzdłuż paska, ale wrażliwe szczepy wynikają zahamowanie wzrostu do 10 mm od paska. Typowe wzorce wzrostu są zatem następujące:


Podstawowy Fuchsin 1: 200

Thionin 1: 600

Brucella abortus

wzrost

brak wzrostu

Brucella melitensis

wzrost

wzrost

Brucella suis

brak wzrostu

wzrost

Obejmują jednak wyjątki od powyższego i dlatego wskazane jest oparcie identyfikacji na wielu cechach5.

Powolny wzrost gatunków Brucella w działaniu z ich zapotrzebowaniem na składniki odżywcze o wysokiej wartości odżywczej oznacza, że ​​należy zastosować środki selektywne, aby umożliwić przekształcanie organizmów działających z mlekiem lub tkanką weterynaryjną.

Pożywki zawierające barwniki bakteriostatyczne hamują szczepy Brucella abortus biotyp 2 i inne wybredne szczepy. Antybiotyki używane zamiast barwników umożliwiająliwiały wzrost wszystkich biotypów gatunków Brucella na selektywne podłożach1. Jednak Leech i wsp. 6 wykazali, że preparat antybiotyk-glukoza w surowicy1 nie był wystarczająco selektywny i był mniej skuteczny niż szczepienie świnki morskiej.

Barrow i Peel7 zmodyfikowane selektywne medium opracowane przez Mair8. Zawierał małe antybiotyki, jak i fiołek goryczki. Brak wzrostu liczby szczepów Brucella abortus potwierdził ich wrażliwość na bardzo niskie wartości barwnika rozpoznawanego przez Mair.

Farrell9 opracował selektywną pożywkę zawierającą antybiotyk, która zawierała bacytracynę 25iu / ml, wankomycynę 20 mg / ml, cykloheksymid 100 mg / ml i nystatynę 100iu / ml w podłożu agarowo-glukozowym w surowicy.

W analizie porównawczej 10 wykazano, że pożywka zapewnia współczynnik równoważenia równoważności z osiąganym przez zaszczepienie świnki morskiej. Wspierało także wzrost szczepów biotypu 2 Brucella abortus.

Brucella Selective Supplement SR0083 jest oparty na doskonałej formule Farrella. Jego większa skuteczność w tłumieniu