REINFORCED CLOSTRIDIAL MEDIUM (RCM)
Kod: CM0149
Półstała pożywka do liczenia i hodowli Clostridia i innych beztlenowców występujących w żywności i okazach patologicznych. Jest to podstawowa pożywka dla różnicowo wzmocnionego podłoża Clostridial.
Typowa formuła * gm / litr
Ekstrakt drożdżowy 13,0
Pepton 10,0
Glukoza 5.0
Rozpuszczalna skrobia 1.0
Chlorek sodu 5.0
Octan sodowy 3.0
Chlorowodorek cysteiny 0,5
Agar 0,5
pH 6,8 ± 0,2
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Zawiesić 38 gw 1 litrze wody destylowanej. Doprowadzić do wrzenia, aby całkowicie się rozpuściły. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut.
Opis
Półstałe podłoże do liczenia i uprawy beztlenowców. Zalecany do izolacji i hodowli organizmów beztlenowych występujących w różnych siedliskach, w tym w żywności i okazach patologicznych.
Wzmocniona pożywka Clostridial (RCM) została zaprojektowana przez Hirsch & Grinstead1 do uprawy i zliczania Clostridia. Wykazali, że podłoże było bardziej żyzne i umożliwiło zainicjowanie wzrostu z małej inokuli łatwiej niż pięć innych badanych pożywek. W dalszym porównaniu wykorzystano kryterium największej możliwej do uzyskania liczby rentowności i ponownie RCM okazał się lepszy. W porównaniu z ośrodkiem do infuzji śledziony firmy Mundt i Jones2, RCM dało nieco wyższe liczby (Gibbs i Hirsch3).
Wzmocnione podłoże Clostridial może być różnicowane w przypadku Clostridia redukującego siarczyny przez dodanie siarczynu sodu i cytrynianu żelazawego4. Różnicowo wzmocnione podłoże Clostridial jest zalecane do wykrywania Clostridia redukującego siarczyny i Clostridium perfringens w wodzie do picia5.
Przygotowanie różnicowo wzmocnionego podłoża Clostridium
Przygotuj oddzielne roztwory 4% siarczynu sodu (bezwodnego) i 7% cytrynianu żelazowego w wodzie destylowanej. Podgrzać roztwór cytrynianu żelazowego do rozpuszczenia. Sterylizuj oba roztwory przez filtrację. Roztwory można przechowywać w temperaturze 4 ° C przez okres do 14 dni.
W dniu użycia wymieszaj równe objętości obu roztworów. Dodaj 0,5 ml mieszaniny do każdej objętości 25 ml świeżo parzonej i schłodzonej Wzmocnionej Pożywki Clostridial o pojedynczej mocy. Do każdej objętości 10 ml i 50 ml podłoża o podwójnej mocy dodać odpowiednio 0,4 ml i 2 ml zmieszanych roztworów.
Wszystkie kultury wykazujące czernienie należy poddać subkulturze do testów potwierdzających.
Zmodyfikowane przez Weenk, Fitzmaurice i Mossel6 różnicowo wzmocnione podłoże Clostridialne poprzez zwiększenie zawartości żelaza do 1 grama / litr cytrynianu żelazowo-amonowego i dokładne dostosowanie stężenia siarczynu do 0,05% heptahydratu siarczynu disodowego. Czas potrzebny do czernienia kolonii Clostridium redukujących siarczyny był znacznie krótszy niż w przypadku użycia agaru z siarczynem żelaza. Zmodyfikowane podłoże w dużym stopniu hamowało tworzenie czarnych kolonii przez pozytywny dla siarkowodoru Bacillus spp. Odporność na metronidazol i wzrost na aerobowo inkubowanym agarze tryptonowym sojowym są wiarygodnymi kryteriami rozpoznawania Bacillus spp. rozwijające się kolonie.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane podłoże przechowuj w temperaturze 2-8 ° C.
Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek
Przygotowane podłoże: roztwór w kolorze słomy
