CHOLERA MEDIUM TCBS
Kod: CM0333
Selektywne podłoże izolacyjne dla patogennych wibracji.
Typowa formuła * gm / litr
Ekstrakt drożdżowy 5.0
Pepton bakteriologiczny 10,0
Tiosiarczan sodu 10,0
Cytrynianu sodowego 10,0
Żółć wołowa 8.0
Sacharoza 20,0
Chlorek sodu 10,0
Cytrynian żelazowy 1.0
Błękit bromotymolowy 0,04
Tymolowy niebieski 0,04
Agar 14,0
pH 8,6 ± 0,2 przy 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Zawiesić 88 g w 1 litrze wody destylowanej. Zagotuj, aby całkowicie rozpuścić medium. NIE AUTOCLAVE.
Wlać płytki bez dalszego podgrzewania i wysuszyć przed użyciem.
Opis
Kobayashi, Enomoto, Sakazaki i Kuwahara1 opracowali pożywki TCBS z agaru selektywnej izolacji Nakanishi2.
Pożywka Oxoid TCBS jest zgodna z recepturą Kobayashi i wsp., Z tym wyjątkiem, że zawiera specjalnie przetworzoną żółć wołową, wolną od wad zauważonych przez Nakanishi i Kobayashi.
Złożoność składu tego podłoża oznacza, że jednolitość wzrostu jest trudnym standardem do utrzymania. Kilka badań wykazało różnice między partiami TCBS Medium wykonanymi przez różne firmy3,4,5,6.
Kontrola jakości przez producentów tej pożywki jest szczególnie ważna, ponieważ zadowalające hamowanie prawidłowej flory jelitowej i brak hamowania niektórych gatunków Vibrio jest bardzo krytyczny. West i wsp.7 wykazali, że Oxoid TCBS Medium zbliżył się do swoich kryteriów dla zadowalającego produktu.
WHO ustanowiło minimalne dopuszczalne wytyczne dotyczące odzyskiwania gatunków Vibrio na TCBS Medium8.
Pożywka Oxoid nadaje się do wzrostu Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus i większości innych Vibrios9.
Większość Enterobacteriaceae występująca w kale jest całkowicie tłumiona przez co najmniej 24 godziny. Może wystąpić niewielki wzrost gatunków Proteus i Enterococcus faecalis, ale kolonie można łatwo odróżnić od kolonii vibrio.
Oxoid TCBS Medium jest kompletny i nie wymaga żadnych dodatków ani aseptycznych dodatków krwi. W związku z tym wykazuje znaczną przewagę nad agarem Laururosulfat Tellurite, który wymaga dalszych dodatków po sterylizacji. Oprócz tego współczynnika wygody ma on również lepsze cechy wzrostu dla gatunków Vibrio, w porównaniu z nośnikami tellurystycznymi. Hamując substancje inne niż wibracyjne, promuje szybki wzrost patogennych wibracji po całonocnej inkubacji w temperaturze 35 ° C. Do izolacji innych wibracji z próbek środowiskowych konieczna jest inkubacja w niższych temperaturach, 20-30 ° C.
Kolonialny wygląd organizmów na pożywce TCBS
24 godziny inkubacji w 35 ° C.
Organizmy
Kolonie
Vibrio cholera i typ El Tor
Żółty, płaski, średnica 2-3 mm
Vibrio parahaemolyticus
Niebiesko-zielony, średnica 3-5 mm
Vibrio alginolyticus
Żółty, średnica 3-5 mm
Vibrio metschnikovii 10
Żółty, średnica 3-4 mm
Vibrio fluvialis 11
Żółty, średnica 2-3 mm
Vibrio vulnificus 12
Niebiesko-zielony, średnica 2-3 mm
Vibrio mimicus 13
Niebiesko-zielony, średnica 2-3 mm
Gatunki Enterococcus
Żółty, średnica 1 mm
Gatunki Proteus
Żółto-zielony, średnica 1 mm
Gatunki Pseudomonas
Niebiesko-zielony, średnica 1 mm
Niektóre szczepy Aeromonas hydrophila rosną, wytwarzając żółte kolonie, ale Plesimonas shigelloides zwykle nie rośnie dobrze na TCBS.
Technika
Rozprowadź kał lub subkulturę z podłoża wzbogacającego, np. Alkaliczna woda peptonowa na powierzchni Oxoid TCBS Cholera Medium. Inkubować płytki przez 18–24 godzin w temperaturze 35 ° C w przypadku próbek klinicznych lub w niższej temperaturze w przypadku próbek środowiskowych.
Kultury wyhodowane na TCBS należy szybko zbadać po usunięciu z inkubatora, ponieważ żółte kolonie kultur Vibrio, np. Vibrio cholerae, może zmienić kolor na zielony po pozostawieniu w temperaturze pokojowej9.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane podłoże przechowuj w temperaturze 2–8 ° C.
Wygląd
Medium odwodnione: słomy / zielony, sypki proszek
Przygotowane podłoże: żel w kolorze zielonym