PODSTAWA AGAROWA BURKHOLDERIA CEPACIA
KOD: CM0995
Podłoże do selektywnej izolacji Burkholderia cepacia od wydzielin oddechowych pacjentów z mukowiscydozą i do rutynowych badań niesterylnych roztworów soli nieorganicznych zawierających środek konserwujący.
Typowa formuła * gm / litr
Pepton 5.0
Ekstrakt drożdżowy 4.0
Pirogronian sodu 7.0
Dwuwodorofosforan potasu 4.4
Wodorofosforan disodowy 1.4
Sole żółciowe 1.5
Saletra amonowa 1.0
Siarczan magnezu 0.2
Siarczan żelazawy amonu 0,01
Czerwony fenol 0,02
Krystaliczny fiolet 0,001
Agar 12,0
pH 6,2 ± 0,2 @ 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Zawiesić 18,25 g bazy agarowej Burkholderia cepacia w 500 ml wody destylowanej, dobrze wymieszać i wysterylizować w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Schłodzić do 50 ° C i aseptycznie dodać zawartość jednej fiolki z Burkholderia cepacia Selective Supplement SR0189, odtworzoną zgodnie z zaleceniami. Dobrze wymieszaj i rozprowadź na sterylne płytki Petriego.
Opis
Burkholderia cepacia (dawniej znana jako Pseudomonas cepacia) jest ruchliwą bakterią Gram-ujemną, bakteryjną, bakterią tlenową, powszechnie występującą w zbiornikach płynnych i wilgotnym środowisku. Komórki mają szerokość od 0,5 do 1,0 mm i długość 5 mm. Jest ważnym patogenem oportunistycznym i powoduje zakażenie płuc u osób z mukowiscydozą (CF). Izolaty od pacjentów z mukowiscydozą często wykazują oporność na wiele leków, a nawet 20% skolonizowanych osób ulega zespołowi Burkholderia cepacia, martwiczemu zapaleniu płuc związanemu z gorączką, której kulminacją jest szybkie i śmiertelne pogorszenie stanu klinicznego1. Agar Oxoid's Burkholderia cepacia oparty jest na PC Medium opracowanym pierwotnie przez Gilligan i in. gdzie wykazano, że jest lepszy dla wzrostu Burkholderia cepacia po 48 godzinach w porównaniu do MacConkey2.
Pierwotnie odizolowany od cebuli, Burkholderia cepacia może przetrwać przez długi czas i namnażać się w nieprzyjaznym środowisku, takim jak roztwory antyseptyczne i dezynfekujące, woda destylowana, wanny z hydromasażem, nebulizatory i komercyjnie pakowane zestawy cewników moczowych3. Wybuch w Arizonie w 1998 r. Z powodu zanieczyszczonego bezalkoholowego płynu do płukania jamy ustnej został zbadany przez Food and Drug Administration (FDA), który zasugerował związek z procedurą dejonizacji wody użytej do przygotowania produktu4. Organizm może występować w małych ilościach w wielu niesterylnych produktach stosowanych w szpitalach. Został wyizolowany z różnych źródeł wody i może rosnąć w wodzie destylowanej ze źródłem azotu ze względu na jego zdolność do wiązania dwutlenku węgla z powietrza5. Cewniki ssące przepłukane roztworem kwasu octowego zmniejszają częstość przenoszenia Burkholderia cepacia i innych pseudomonad.
Wolniej rosnącą Burkholderia cepacia można pominąć na konwencjonalnych podłożach, takich jak krew lub MacConkey Agar, z powodu przerostu spowodowanego przez inne szybciej rosnące organizmy występujące w drogach oddechowych pacjentów z CF, takie jak śluzowate gatunki Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa i gatunki Staphylococcus. Może to prowadzić do pominięcia lub błędnej diagnozy infekcji.
Technika
Pobierz rutynową próbkę oddechową od pacjenta, np. sputa, wymaz z głębokich gardła lub popłuczyny oskrzeli. W razie potrzeby rozcieńczyć próbkę w roztworze Ringera, aby uzyskać rozcieńczenie 1: 2. Nanieść na podłoże Burkholderia cepacia i inkubować w 37 ° C przez 48 do 72 godzin.
Zbadaj po 48 godzinach pod kątem kolonii szałwii i podłoża zmieniającego kolor ze słomkowo-zielonego na jasnoróżowy. Wszystkie kolonie powinny być dalej identyfikowane i potwierdzane. W razie potrzeby ponownie inkubuj przez kolejne 24 godziny.
Typowe kolonie Burkholderia cepacia są okrągłe i całe. Tworzenie kolorów opiera się na naturalnej ekspresji pigmentu, a kolonie różnią się od szarego do szałwiowego zielonego, przy czym medium zmienia się z pomarańczowego na jasny różowy.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane płytki z medium przechowuj w temperaturze 2–8 ° C.
Wygląd
Pożywka odwodniona: słomkowo-różowy, sypki proszek
Przygotowane podłoże: żel w kolorze pomarańczowym
