Palcam Agar Base, pożywka sypka

PODSTAWA AGAR PALCAM

Kod: CM0877

selektywne i różnicowe podłoże diagnostyczne do wykrywania Listeria monocytogenes

Typowa formuła * gm / litr

Baza agaru z krwią Columbia 39,0

Ekstrakt drożdżowy 3.0

Glukoza 0,5

Eskulina 0,8

Cytrynian żelazowo-amonowy 0,5

Mannitol 10,0

Czerwony fenol 0,08

Chlorek litu 15,0

pH 7,2 ± 0,2 w 25 ° C

 * Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności

WYBÓR SELEKTYWNY PALCAM

Kod: SR0150

Typowa formuła * na litr
Polimyksyna B. 10,0 mg

Chlorowodorek akryblawiny 5,0 mg

Ceftazydym 20,0 mg

* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności

Kod zamówienia produktu
Objętość medium

SR0150E
10 x 500 ml pożywki

SR0150B
10 x 2,5 litra medium

Sposób użycia 
Zawiesić 34,5 g na 500 ml wody destylowanej. Doprowadzić delikatnie do wrzenia, aby całkowicie się rozpuściły. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Schłodzić do 50 ° C i aseptycznie dodać Selektywny suplement PALCAM (SR0150), odtworzyć zgodnie z instrukcją. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego.

Dodatek 2,5% (v / v) emulsji żółtka jaja (SR0047) do pożywki może pomóc w odzyskaniu uszkodzonej Listeria.

Opis
Pożywka PALCAM oparta jest na preparacie opisanym przez Van Netten i in. 1 i jest zalecana do izolacji Listeria monocytogenes z żywności.

Zwiększona świadomość i obawy związane z obecnością Listeria monocytogenes w żywności spowodowały rozwój wielu mediów do jej izolacji2,3,4,5. Jednak Cassiday i Brackett6 stwierdzili, że żadna obecnie dostępna metoda nie była odpowiednia do stosowania ze wszystkimi rodzajami żywności.

Pożywka PALCAM jest wysoce selektywna ze względu na obecność chlorku litu, ceftazydymu, polimyksyny B i chlorowodorku akryflawiny. Umożliwia łatwą diagnostykę różnicową Listeria monocytogenes dzięki wykorzystaniu systemu podwójnych wskaźników.

eskulina i żelazo
mannitol i czerwień fenolowa
Listeria monocytogenes hydrolizuje eskulinę, powodując powstanie czarnej aureoli wokół kolonii. Listeria monocytogenes nie fermentuje mannitolu, więc można łatwo odróżnić od zanieczyszczeń, takich jak enterokoki i gronkowce, ponieważ będą one fermentować mannitol. Ten preparat powoduje zmianę z czerwonego na żółty we wskaźniku pH czerwieni fenolowej. Doniesiono o dodaniu żółtka jaja do pożywki PALCAM w celu naprawy uszkodzonych komórek3.

Inkubacja w warunkach mikroaerofilowych służy do hamowania ścisłych tlenowców, takich jak Bacillus spp. i Pseudomonas spp. które mogłyby się pojawić na nośniku. Modyfikacja pożywki PALCAM, w której płytki inkubowane są nałożone na pożywkę zawierającą krew, umożliwia hemolityczne Listeria spp. być zróżnicowanym i wyliczonym7. Inkubacja w warunkach mikroaerobowych służy do hamowania ścisłych tlenowców, takich jak Bacillus spp. i Pseudomonas spp. które mogłyby się pojawić na nośniku.

Technika
Techniki izolacji Listeria monocytogenes będą zależeć od badanego materiału. Zazwyczaj próbkę testową najpierw zaszczepia się bulionem wzbogacającym, aby umożliwić namnożenie przed izolacją i identyfikacją. W zależności od rodzaju użytej próbki, przed zaszczepieniem na płytkach PALCAM Medium należy zastosować odpowiednią metodę i bulion selektywnego wzbogacania. Jako ogólną zasadę należy stosować Listeria Selective Enrichment Medium (CM0862 i SR0149) w przypadku produktów mlecznych oraz Listeria Selective Enrichment Media UVM (CM0863, SR0142 i SR0143) i Fraser Broth (CM0895 i SR0156) w przypadku mięsa i drobiu.

Zaszczepić jedną pętlę bulionu z selektywnym wzbogacaniem na płytki Medium PALCAM.
Inkubować w 37 ° C przez 48 godzin w warunkach mikroaerofilnych. Warunki mikroaerofilne można najlepiej osiągnąć, stosując zestaw do generowania gazu Oxoid Campylobacter (BR0056) w połączeniu ze słoikiem beztlenowym Oxoid i aktywnym katalizatorem (BR0042). W przypadku słoików o mniejszej pojemności (2,5 litra) użyj zestawu do generowania gazu Oxoid Campylobacter (BR0060). Alternatywnie użyj CampyGen (CN0025 lub CN0035). CampyGen nie wymaga dodawania wody ani katalizatora.
Zbadaj typowe kolonie Listeria po 48 godzinach inkubacji.
Kolonie zidentyfikowane jako domniemane Listeria spp. musi zostać potwierdzony badaniami biochemicznymi i serologicznymi8.
Po 48 godzinach inkubacji typowa Listeria spp. tworzą kolonie o średnicy około 2 mm, szaro-zielonym kolorze z czarnym zapadniętym środkiem i czarną aureolą na czerwonym tle wiśniowym. Sporadycznie enterokoki lub gronkowce rozwijają się na podłożu PALCAM, tworząc szare kolonie z brązowo-zielonym halo lub żółte kolonie z żółtym halo.

Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przechowuj selektywny suplement w ciemności w temperaturze 2-8 ° C i użyj go przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowaną pożywkę można przechowywać do 4 tygodni w temperaturze 2-8 ° C w ciemności.

Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek
Przygotowane podłoże: czerwony żel