Bolton Broth Base, pożywka sypka

BOLTON SELEKTYWNY WZMOCNIENIE BRAT

BRĄZ BOLTONOWY

KOD: CM0983

Pożywka do selektywnego wstępnego wzbogacania organizmów Campylobacter w próbkach żywności.

Typowa formuła * gm / litr

Pepton mięsny 10,0

Hydrolizat laktalbuminy 5.0

Ekstrakt drożdżowy 5.0

Chlorek sodu 5.0

Kwas alfa-ketoglutarowy 1.0

Pirogronian sodu 0,5

Pirosiarczyn sodu 0,5

Węglan sodu 0,6

Haemin 0,01

pH 7,4 ± 0,2 w 25 ° C

 
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności

Sposób użycia 
Dodaj 13,8 g bulionu Bolton do 500 ml wody destylowanej. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Schłodzić do 50 ° C. Aseptycznie dodaj 25 ml Laked Horse Horse SR0048 i 1 fiolkę Bolton Broth Selective Supplement SR0183, odtworzoną zgodnie z zaleceniami. Dobrze wymieszaj i rozprowadź w sterylnych zakręcanych pojemnikach.

Opis
Bolton Selective Enrichment Bulion jest przeznaczony do wstępnego wzbogacania Campylobacter w próbkach żywności. Campylobacter to Gram-ujemne, spiralnie ukształtowane mikroaerofilne organizmy, które mogą występować w surowym mleku, nieoczyszczonej wodzie, niewłaściwie obchodzonej się z żywnością i niedogotowanym mięsie, drobiu i skorupiaków. Spożycie tych organizmów przez ludzi może powodować szereg chorób klinicznych, od przejściowej bezobjawowej kolonizacji po ciężką czerwonkę. Objawy zapalenia jelit Campylobacter obejmują biegunkę, ból brzucha, nudności, gorączkę, ból głowy i ból mięśni. Powikłania zakażenia Campylobacter jejuni mogą obejmować niepotrzebne wyrostki robaczkowe w wyniku bólu brzucha, reaktywnego zapalenia stawów lub zespołu Guillian-Barré1. Infekcja Campylobacter jest uznawana za jedną z najczęstszych przyczyn bakteryjnego zapalenia żołądka i jelit u ludzi, a minimalna dawka zakaźna może wynosić nawet 500–800 komórek1.

Ponieważ świadomość widocznej roli Campylobacter w ludzkich chorobach została zwiększona przez Skirrowa w 1977 r., W odpowiedzi na potrzebę optymalizacji wydajności wyewoluowała ogromna liczba pożywek hodowlanych. Wczesne rozpoznanie potrzeby wzbogacania kultury podczas badania próbek żywności w celu przezwyciężenia szkodliwych skutków, jakie techniki przetwarzania i konserwacji żywności mogą mieć na komórki Campylobacter. Stosowanie niższych temperatur inkubacji na wczesnych etapach wzbogacania jest obecnie szeroko stosowane jako pomoc w odzyskiwaniu komórek3. Zasada ta została zastosowana przez Boltona przy opracowywaniu bulionu wzbogacającego4.

Campylobacter może zostać zraniony procedurami przetwarzania i konserwacji żywności3. To czyni je podatnymi na czynniki selektywne, które są tolerowane przez nieuszkodzone komórki. Fałszywie ujemnych wyników można uniknąć poprzez zastosowanie pożywki do odzyskiwania, takiej jak bulion selektywnego wzbogacania Bolton, który zwiększa liczbę komórek dostępnych do hodowli, najpierw poprzez resuscytację uszkodzonych organizmów, a następnie zachęcanie ich do namnażania.
Bolton Selective Enrichment Bulion zawiera składniki odżywcze, które pomagają w resuscytacji komórek uszkodzonych subletalnie, i został opracowany tak, aby uniknąć potrzeby atmosfery mikroaerobowej. Początkową inkubację przeprowadza się w temperaturze 30–37 ° C, w zależności od rodzaju badanej żywności. Po wstępnym wzbogaceniu temperaturę inkubacji podnosi się do 42 ° C, aby zwiększyć presję selekcyjną na organizmy konkurujące.

Włączenie pirosiarczynu sodu i pirogronianu sodu do bulionu Bolton gasi toksyczne związki, które mogą tworzyć się w pożywce hodowlanej. Te dodatki zwiększają również tolerancję aerodynamiczną kultury. Antybiotyki zawarte w Bolton Broth Selective Supplement SR0183 optymalizują selektywność dla Campylobacter spp. Wankomycyna - działa przeciw Gram-dodatnim. Cefoperazon - głównie aktywny przeciwko Gram-ujemnym. Trimetoprim - działa na wiele różnych organizmów Gram-ujemnych i Gram-dodatnich. Cykloheksimid - działa przeciw drożdżom.

Technika
Jedna metoda użycia jest następująca:
Umieścić 25 g próbki żywności w 225 ml bulionu selektywnego wzbogacania Bolton (przygotowanego jak opisano powyżej) i homogenizować mieszaninę za pomocą Stomachera (lub podobnego urządzenia). Bulion selektywnego wzbogacania Bolton nie wymaga inkubacji w środowisku mikroaerobowym, ale musi być stosowany w zakręcanych pojemnikach, które są wypełnione w odległości do 20 mm od góry4. Inkubować przez 4 godziny w 37 ° C, a następnie kontynuować inkubację w 42 ° C. Po 24 godzinach i 48 godzinach bulion można poddać subkulturze zmodyfikowanego CCDA (CM0739 + SR0155) lub Preston Agar (CM0689 + SR0117 + SR0048) 4.
Inne metody można znaleźć w BAM5.

Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przechowuj przygotowane podłoże w temperaturze 2–8 ° C przez okres do 2 tygodni.

Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek