BRĄZ MAKONU (FIOLETOWY)
Kod: CM0505
Pożywka różnicowa zawierająca BCP do wykrywania organizmów coli w badaniu wody i mleka.
Typowa formuła * gm / litr
Pepton 20,0
Laktoza 10,0
Sole żółciowe 5.0
Chlorek sodu 5.0
Fiolet bromokrezolowy 0,01
pH 7,4 ± 0,2 w 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Aby przygotować bulion o pojedynczej mocy, dodaj 40 g do 1 litra wody destylowanej. Rozmieścić w pojemnikach wyposażonych w probówki fermentacyjne (Durham). Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut.
Opis
Bulion MacConkey od dawna jest wykorzystywany jako domniemana pożywka do wykrywania organizmów coli-aerogenes. W oryginalnym medium lakmus był stosowany jako wskaźnik produkcji kwasu, ale w późniejszych publikacjach MacConkey sugerował neutralną czerwień jako bardziej zadowalającą alternatywę. Childs i Allen1 wykazali, że niektóre próbki neutralnej czerwieni wywierały działanie hamujące na wzrost Escherichia coli w tym podłożu.
Purpura bromokrezolowa jest mniej hamująca, a zmiana koloru z fioletowego na żółty zapewnia bardziej czułe i wyraźne wskazanie tworzenia kwasu; dlatego ten wskaźnik jest stosowany w bulionie Oxoid MacConkey (fioletowy), co odpowiada alternatywnym formułom zalecanym w „Bakteriologicznym badaniu zasobów wodnych” 2 i „Międzynarodowych normach dotyczących wody pitnej” 3.
Technika
Domniemane badanie coli polega na zaszczepieniu zmierzonych objętości wody w probówkach bulionu MacConkey (fioletowy), które inkubuje się w temperaturze 35 ° C przez 48 godzin. Wybór objętości do zaszczepienia będzie zależeć od bakteriologicznego gatunku badanej wody; w przypadku wód `` średnich '' Komitet ds. Wody Laboratorium Zdrowia Publicznego (1961) zaleca jedną 50 ml, pięć 10 ml i pięć 1 ml ilości wody - 50 ml i 10 ml dodaje się do ich objętości podwójnego bulionu MacConkey o podwójnej mocy, a każda z nich to 1 ml dodano do 5 ml bulionu MacConkey o pojedynczej mocy.
Tworzenie kwasu jest wskazywane przez żółte zabarwienie bulionu, a tworzenie gazu jest wskazywane przez ilość gazu co najmniej wystarczającą do wypełnienia wklęsłości na górze rurki Durham. Na podstawie liczby rurek wykazujących obecność kwasu i gazu, najbardziej prawdopodobną liczbę (przypuszczalnie) bakterii coli obecnych w 100 ml pierwotnej wody można oszacować na podstawie tabel prawdopodobieństwa; te tabele oparte na obliczeniach McCrady'ego są zawarte w raporcie nr 71: „Badanie bakteriologiczne zapasów wody” 2 oraz w wielu innych publikacjach dotyczących tego tematu.
W celu różnicowego testu coli, każda probówka MacConkeya z kwasem i gazem jest następnie hodowana w świeżej probówce bulionu MacConkey i inkubowana w 44 ° C. Tworzenie się gazu w ciągu 48 godzin jest praktycznie specyficzne dla Escherichia coli i wskazuje na zanieczyszczenie kałem oryginalnej próbki wody.
Bulion MacConkey (fioletowy) nadaje się również do badania bakteriologicznego mleka, jak opisał Davis4. Ta metoda, która jest zasadniczo podobna do tej stosowanej do badania wody, polegająca na zaszczepieniu odpowiednich rozcieńczeń mleka w probówkach tego podłoża, a następnie inkubacji i kontroli, została pierwotnie zalecona przez Departament Zdrowia w Londynie5.
Dodanie 4-metylumbelliferylo-ß-D-glukuronidu (MUG) BR0071 do tej pożywki poprawi wykrywanie Escherichia coli.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane podłoże przechowuj w temperaturze pokojowej.
Wygląd
Pożywka odwodniona: zielony, sypki proszek
Przygotowane podłoże: roztwór w kolorze fioletowym