Wilkins Chalgren Anaerobe Agar, pożywka sypka

AGAR ANAEROBOWY WILKINS-CHALGREN

Kod: CM0619

Pożywka do ogólnego wzrostu beztlenowców, zalecana do badania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe. Szczegółowe informacje na temat zastosowania tego podłoża w metodologii AST znajdują się w części dotyczącej badania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe.

Typowa formuła * gm / litr

Tryptone 10,0

Pepton żelatynowy 10,0

Ekstrakt drożdżowy 5.0

Glukoza 1.0

Chlorek sodu 5.0

L-Arginina 1.0

Pirogronian sodu 1.0

Menadione 0,0005

Haemin 0,005

Agar 10,0

pH 7,1 ± 0,2 w 25 ° C

 * Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności

Sposób użycia 
Zawiesić 43 g w 1 litrze wody destylowanej. Doprowadzić do wrzenia, aby całkowicie się rozpuściły. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut.

Opis
Uznając potrzebę standardowego podłoża do badania wrażliwości na bakterie beztlenowe na bakterie bez bakterii, Wilkins i Chalgren1 opracowali nowe podłoże, które nie wymagałoby dodawania krwi. Ich preparat obejmował ekstrakt drożdżowy w celu dostarczenia witamin i innych czynników wzrostu, takich jak puryny i pirymidyny, które są niezbędne do dobrego wzrostu Peptostreptococcus anaerobius i Prevotella melaninogenica. Dodano argininę, aby zapewnić dostępność wystarczającej ilości aminokwasów do wzrostu Eubacterium lentum. Pirogronian dodano jako źródło energii dla kokosowych asocjanów, takich jak Veillonella2. Działa również podobnie do katalazy i degraduje ślady nadtlenku wodoru, które mogą być wytwarzane przez działanie tlenu cząsteczkowego na średnie składniki i zakłócać metabolizm beztlenowców3. Stwierdzono, że hemina ma zasadnicze znaczenie dla wzrostu gatunków Bacteroides4 i menadionu dla Prevotella melaninogenica5.

Peptony pochodzące z pojedynczych źródeł białka, kazeiny i żelatyny, zastosowano do poprawy standaryzacji podłoża. Wilkins i Chalgren1 uważali, że na tym podłożu konsekwentnie rosły także beztlenowce lub lepsze niż takie podłoża, jak Brucella Agar lub Schaedler Anaerobe Agar. Wspólne badanie w dziesięciu laboratoriach wykazało, że można go zastosować w metodzie rozcieńczania agaru do badania wrażliwości bakterii beztlenowych i zalecono procedurę jako metodę referencyjną 6.

Wartość takiej procedury została dodatkowo potwierdzona przez Browna i Waatti7, którzy stwierdzili, że częstość występowania oporności bakterii beztlenowych na często stosowane antybiotyki wzrosła. Uznali za niezbędne, aby laboratoria diagnostyczne miały możliwość przeprowadzania testów wrażliwości na bakterie beztlenowe.

Sposób użycia  

Przygotowanie podłoża nieselektywnego dla wszystkich organizmów beztlenowych
Zawiesić 21,5 g agaru Wilkins-Chalgren Anaerobe (CM0619) w 475 ml wody destylowanej. Doprowadzić do wrzenia, aby całkowicie się rozpuściły. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Ochłodzić do 50 ° C i aseptycznie dodać 25 ml krwi defibryfikowanej (SR0050 / SR0051). Delikatnie wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego (patrz płytka 1).

Przygotowanie selektywnego podłoża dla beztlenowych beztlenowców
Zawiesić 21,5 g agaru Wilkins-Chalgren Anaerobe (CM0619) w 475 ml wody destylowanej zawierającej 0,5 ml „Tween 80”. Doprowadzić do wrzenia, aby całkowicie się rozpuścił i wysterylizować w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Ochłodzić do 50-55 ° C i aseptycznie dodać zawartość 1 fiolki suplementu N-S Anaerobe Suplement (SR0107) ponownie nawodnionego zgodnie z zaleceniami, wraz z 25 ml zdefinowanej krwi (SR0050 / SR0051). Wymieszaj delikatnie