AGAR SCHAEDLER ANAEROBE
Kod: CM0437
Pożywka wolna od tioglikolanu do wzrostu organizmów tlenowych i beztlenowych.
Typowa formuła * gm / litr
Rosół sojowy Tryptone (Oxoid CM129) 10,0
Specjalny pepton 5.0
Ekstrakt drożdżowy 5.0
Glukoza 5.0
Cysteina HCl 0,4
Haemin 0,01
Bufor Tris 0,75
Agar 13.5
pH 7,6 ± 0,2 przy 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Zawiesić 40 g w 1 litrze wody destylowanej i zagotować, aby całkowicie rozpuścić medium. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Dobrze wymieszaj przed nalaniem.
Opis
Schaedler, Dubos i Costello1 opracowali to podłoże do izolacji drobnoustrojów tlenowych i beztlenowych z przewodu pokarmowego myszy. Mata, Carrillo i Villatoro2 zmodyfikowali formułę w swoich badaniach nad beztlenową mikroflorą ludzkiego kału. Zmodyfikowana formuła została zastosowana w Oxoid Schaedler Anaerobe Agar / Bulion, a pożywkę można wykorzystać do stworzenia selektywnych warunków, w których rozwiną się wymagane, delikatne i bardziej odżywcze mikroorganizmy w przewodzie pokarmowym, pomimo obecności organizmów antagonistycznych. Zwykle takie wybredne mikroorganizmy byłyby zalewane wzrostem enterokoków, bakterii z grupy coli i innych bakterii Gram-ujemnych.
W obu badaniach1,2 zastosowanie podłoża podstawowego ze środkami selektywnymi (pokazanymi na odwrocie) do izolacji i oznaczania gatunków Lactobacillus, Streptococcus, Clostridium, Bacteroides i Flavobacterium z próbek kału i różnych narządów przewodu pokarmowego.
Chociaż tioglikolan jest szeroko stosowany w pożywkach beztlenowych, w celu obniżenia potencjału redoks w celu sprzyjania wzrostowi organizmów beztlenowych, niektórzy pracownicy stwierdzili, że hamuje on niektóre beztlenowce3,4.
Agar Schaedler Anaerobe zawiera chlorowodorek cysteiny i glukozę, jako substancje redukujące, z tą zaletą, że cysteina hamuje wzrost Escherichia coli. Kari, Nagy, Kovacs i Hernadi5 opisali hamujący wpływ cysteiny na szereg reakcji enzymatycznych Escherichia coli in vitro.
Agar Schaedler Anaerobe okazał się odpowiednią alternatywą dla agaru z krwią do oznaczania Clostridia6 i był używany do badania żywności, produktów odpadowych i wody w rowie7. Autorzy ci wykazali konieczność ścisłych warunków beztlenowych dla pomyślnego odzyskania obligatoryjnych beztlenowców podczas korzystania z tego podłoża bez dodatku krwi.
Badania w Oxoid wykazały, że agar Schaedler Anaerobe dał podobne wyniki w odzyskiwaniu i kolonialnym wyglądzie bazy agarowej Oxoid Blood nr 2, gdy był testowany z tymi samymi organizmami.
Technika
Zawiesinę próbki rozcieńcza się w razie potrzeby w celu uzyskania oddzielnych i policzalnych kolonii. Skalibrowaną pętlę rozprowadza się następnie na powierzchni wcześniej wysuszonej płytki Schaedler Anaerobe Agar. Warunki inkubacji będą się różnić w zależności od rodzaju badanej kultury. Czyste kultury mogą rosnąć na podłożu podstawowym i jest to również wykorzystywane do ogólnej liczby tlenowej i beztlenowej.
W wyliczeniu Enterococcus faecalis (fakultatywnie beztlenowy) jako organizmu wskaźnikowego w odwodnionej lub zamrożonej żywności i wodzie oraz do wykrywania Clostridium, pożywkę można stosować w następujący sposób:
Zawiesiny próbek żywności (np. Gotowanej mrożonej żywności) wysiewa się za pomocą techniki rozprowadzania na powierzchni i można przeprowadzić tlenową liczbę żywą w temperaturze 25 ° C i 35 ° C. W przypadku wstępnie ugotowanych produktów mięsnych należy również przeprowadzić beztlenową żywotność i selektywne badanie płytki na Clostridium perfringens.
Dodanie środków selektywnych
Do 1000 ml podstawowego agaru można dodać następujące środki selektywne:
1. Pożywka dla beztlenowych bakterii mlekowych i paciorkowców beztlenowych: NaCl 10,0 g; Neomycyna 0,002 g. Inkubować beztlenowo w temperaturze 35 ° C.
2. Pożywka dla Bacteroides i Clostridia: proszek łożyska 2,0 g; Neomycyna 0,002 g. Inkubować beztlenowo w temperaturze 35 ° C.
3. Pożywka dla flawobakterii: 7 ml 0,5% tyrotricyny w etanolu. Inkubować tlenowo w temperaturze 35 ° C.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane płytki można przechowywać w temperaturze 2-8 ° C, jeśli są odpowiednio chronione.
Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek
Przygotowane podłoże: żel o kolorze od jasnego do słomkowego
