ZMODYFIKOWANA PÓŁSYLIDOWA RAPPAPORT VASSILIADIS (MSRV) MEDIUM BASE
Kod: CM0910
Półstałe podłoże do wykrywania ruchliwych gatunków Salmonelli z próbek żywności i próbek środowiskowych.
Typowa formuła * gm / litr
Tryptoza 4.59
Hydrolizat kazeiny 4.59
Chlorek sodu 7.34
Dwuwodorofosforan potasu 1,47
Chlorek magnezu (bezwodny) 10,93
Malachitowy zielony szczawian 0,037
Agar 2.7
pH 5,4 ± 0,2 przy 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
MSRV SELEKTYWNY SUPLEMENT
Kod: SR0161
Zawartość fiolki (każda fiolka wystarcza na 500 ml pożywki)
na fiolkę/ na litr
Nowobiocyna
10,0 mg
20,0 mg
Sposób użycia
Zawiesić 15,8 g średniej bazy MSRV w 500 ml wody destylowanej. Doprowadzaj do wrzenia z częstym mieszaniem.
NIE AUTOCLAVE. Ochłodzić do 50 ° C i aseptycznie dodać zawartość 1 fiolki MSRV Selective Supplement SR0161E rozpuszczonej w 2 ml sterylnej wody destylowanej. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego. Suszyć na powietrzu w temperaturze pokojowej przez co najmniej godzinę. (Płytki mogą być suszone powietrzem przez noc przed przechowywaniem w 2-8 ° C.)
Opis
Zmodyfikowane półstałe podłoże Rappaport Vassiliadis (MSRV) oparte jest na preparacie opisanym przez De Smedt i in. wykazano, że wykrywa więcej próbek dodatnich pod względem Salmonelli niż tradycyjne procedury wzbogacania1,2. Dalsze wspólne badania potwierdziły te ustalenia3,4.
Wzbogacanie ruchliwości w pożywce MSRV zostało zaprojektowane jako prosta, wrażliwa metoda izolacji salmonelli z próbek żywności i próbek środowiskowych. Wydajność pożywki opiera się na zdolności migracji salmonelli przez pożywkę selekcyjną przed konkurującymi organizmami ruchowymi, wytwarzając w ten sposób nieprzezroczyste halo wzrostu.
Dalsze testy można przeprowadzić bezpośrednio z migrowanej kultury, a inokulum pobiera się z krawędzi wzrostu. W celu potwierdzenia serologicznego gatunków Salmonella można zastosować test lateksowy Oxoid Salmonella FT0203 lub DR1108.
Pożywka nie nadaje się do wykrywania nieruchliwych szczepów Salmonelli (częstość 5. (Dane uzyskane z rejestrów Departamentu Patogenów Jelitowych, Central Public Health Laboratory, Colindale, Londyn. Dr B. Rowe, Personal Communication, 1988). )
Technika
1. Zaszczepić maksymalnie trzy krople (ok. 0,1 ml) wstępnie wzbogaconej hodowli (po inkubacji przez 16-20 godzin) w oddzielnych, równomiernie rozmieszczonych miejscach na powierzchni płytek z pożywką MSRV.
2. Inkubować płytki w pozycji pionowej w 42 ° C przez maksymalnie 24 godziny. (Należy uważać, aby nie przekroczyć 24 godzin).
3. Zbadaj płytki pod kątem bakterii ruchliwych, które będą wykazywać aureolę wzrostu pochodzącą z miejsca zaszczepienia.
4. Subkultury można pobrać z zewnętrznej krawędzi halo, aby potwierdzić czystość oraz do dalszych testów biochemicznych i serologicznych.
De Smedt6 podał, że jeśli pożywka MSRV jest zawarta w probówkach i inkubacja jest przeprowadzana w warunkach beztlenowych, widoczne strefy migracji powstają w ciągu 6 godzin, umożliwiając wykrycie Salmonelli w żywności w ciągu 24 godzin.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przechowuj selektywny suplement w ciemności w temperaturze 2-8 ° C i użyj go przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowaną pożywkę można przechowywać do 2 tygodni w temperaturze 2-8 ° C z dala od światła.
Wygląd
Pożywka odwodniona: zielony, sypki proszek
Przygotowane medium: półstały żel w kolorze niebieskim