AGAR SABOURAUD DEXTROSE
Kod: CM0041
kwaśne środowisko pH do izolacji dermatofitów, innych grzybów i drożdży
Typowa formuła * gm / litr
Pepton mikologiczny 10,0
Glukoza (dekstroza) 40,0
Agar 15,0
pH 5,6 ± 0,2 przy 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Dodaj 65 g do 1 litra wody destylowanej. Doprowadzić do wrzenia, aby całkowicie się rozpuściły. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego.
Opis
Ta modyfikacja agaru Sabouraud (Carlier1) jest odpowiednia do hodowli i różnicowania grzybów.
Carlier wykazał, że pożywka daje wiarygodne wyniki z Microsporum audouini, Microsporum canis, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton flavum, Trichophyton rubrum i Candida albicans. Agar Sabouraud z dekstrozą można stosować zamiast standardowej amerykańskiej pożywki Hodges2. Grzyby zachowują swój typowy wygląd kulturowy, dzięki czemu można je łatwo zidentyfikować zgodnie ze standardowymi znakami makroskopowymi opisanymi przez Sabourauda3.
Podłoże jest często stosowane z antybiotykami do izolacji grzybów chorobotwórczych z materiału zawierającego dużą liczbę innych grzybów lub bakterii.
Georg i wsp. 4 aseptycznie dodali 0,5 g cykloheksymidu, 20 000 jednostek penicyliny i 40 000 jednostek streptomycyny do każdego litra autoklawowanego, chłodzonego ośrodka. Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus i Allescheria boydii są wrażliwe na cykloheksymid; Actinomyces bovis i Nocardia asteroides są wrażliwe na penicylinę i streptomycynę. Alternatywnie można dodać 0,4 g chloramfenikolu i 0,05 g cykloheksymidu do każdego litra odtworzonego podłoża przed autoklawowaniem (Ajello5). Te same mikroorganizmy są wrażliwe na tę nową kombinację - patrz Dermasel Selective Supplement SR0075.
Williams Smith i Jones6 zastosowali Oxoid Sabouraud Dextrose Agar, zawierający 20 000 jednostek penicyliny i 0,04 g neomycyny na litr, do liczenia drożdży w przewodzie pokarmowym świni. Hantschke7 użył kolistyny, nowobiocyny i cykloheksymidu do izolacji Candida albicans. Dolan8 zastosował gentamycynę, chloramfenikol i cykloheksimid do selektywnej izolacji grzybów chorobotwórczych.
Agar Oxoid Sabouraud z dekstrozą może być również stosowany jako podstawa podłoża Pagano-Levin9 do izolacji Candida albicans. 0,1 g chlorku trifenylotetrazoliowego (jako roztwór sterylizowany na filtrze) dodaje się do każdego litra autoklawowanego stopionego ośrodka schłodzonego do 55 ° C. Pożywka jest zwykle hamowana przez większość niepatogennych grzybów i bakterii przez dodanie antybiotyków jak wyżej. Po inkubacji przez 3 dni w temperaturze 25 ° C kolonie Candida albicans są pozbawione pigmentów lub jasnoróżowe, podczas gdy inne gatunki Candida i inne grzyby tworzą głębiej różowe lub czerwone kolonie. Test jest odpowiedni do celów badań przesiewowych, ale należy również zastosować inne kryteria diagnostyczne do identyfikacji Candida albicans10,11,12,13. Kontrola jakości agaru Oxoid Sabouraud Dextrose Agar obejmuje badanie zgodnie z ISO: 11133 201414.
Technika
Zaszczepić każdą próbkę w dwóch egzemplarzach.
Inkubuj jeden zestaw pożywek aerobowo w 22-25 ° C, a drugi zestaw w 35 ° C przez 5-30 dni. Poluzuj nakrętki rurek i zapewnij odpowiednią wilgotność płyt, aby zrekompensować utratę pary wodnej. NIE ZAMYKAJ PŁYT.
Zbadaj co 2-4 dni.
Opisz każdy konkretny typ morfologii i subkultury kolonii odpowiednim mediom do dalszych testów identyfikacyjnych.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane podłoże przechowuj w temperaturze 2-8 ° C.
Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek.
Przygotowane podłoże: żel w kolorze od słomkowego do słomkowego.
