Lysine Medium Base, pożywka sypka

LYSINE MEDIUM

Kod: CM0191

Syntetyczne podłoże do izolacji i liczenia dzikich drożdży spotykanych w warzeniu. Na tym podłożu drożdże smołowe są tłumione.

Typowa formuła * gm / litr

Glukoza 44,5

Dwuwodorofosforan potasu 1,78

Siarczan magnezu 0,89

Topiony chlorek wapnia 0,178

Chlorek sodu 0,089

Adenina 0,00178

DL-metionina 0,000891

L-histydyna 0,000891

DL-tryptofan 0,000891

Kwas borowy 0,0000089

Siarczan cynku 0,0000356

Molibdenian amonu 0,0000178

Siarczan manganu 0,0000356

Siarczan żelazawy 0,0002225

Lizyna 1.0

Inozytol 0,02

Pantotenian wapnia 0,002

Aneurine 0,0004

Pirydoksyny 0,0004

kwas p-aminobenzoesowy 0,0002

Kwas nikotynowy 0,0004

Ryboflawina 0,0002

Biotyna 0,000002

Kwas foliowy 0,000001

Agar 17,8

pH (patrz wskazówki)

* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności

Sposób użycia 
Zawiesić 6,6 g w 100 ml wody destylowanej zawierającej 1,0 ml mleczanu potasu SR0037. Doprowadzić do wrzenia, aby całkowicie się rozpuściły. Często mieszaj, aby zapobiec przegrzaniu. Ochłodzić do 50 ° C i dodać 0,1 ml kwasu mlekowego 10% SR0021, aby doprowadzić pH do 4,8 ± 0,2. Nalej na szalki Petriego i usuń wilgoć z powierzchni poprzez suszenie w 37 ° C.

Opis
Złożone podłoże, pierwotnie opisane przez Morrisa i Eddy1 do izolacji i liczenia dzikich drożdży w drożdżach pakowych. Walters i Thiselton2 zbadali 180 gatunków drożdży w płynnym syntetycznym podłożu zawierającym lizynę jako jedyne źródło azotu. Odkryli, że żadne normalne szczepy cerevisiae ani carlsbergensis nie wykorzystywały lizyny, podczas gdy wiele innych drożdży, w tym drożdże dzikie, uczyniło to. Hodowle podstawowe utrzymywano na stokach agaru z wyciągiem słodowym lub na agarze kredowym z wyciągiem słodowym w przypadku gatunków Brettanomyces. Później Morris i Eddy1 opisali stałą pożywkę lizynową do izolacji i liczenia dzikich drożdży w drożdżach pakowych. Agar z lizyną Oxoid jest wytwarzany zgodnie z ich opublikowaną formułą.

Technika
Umyj i odwiruj próbkę drożdży trzykrotnie wodą destylowaną. Usunąć 0,2 ml zawiesiny zawierającej około 107 komórek na ml i rozprowadzić wygiętym drutem platynowym na powierzchni płytki z lizyną. Inkubować w temperaturze 25 ° C i codziennie sprawdzać, czy nie występują oznaki wzrostu. Policz liczbę rozwijających się kolonii i wyrażaj stopień zanieczyszczenia jako liczbę komórek dzikich drożdży na milion komórek pierwotnego inokulum.

Liczba komórek w inokulum jest ważna, ponieważ Morris i Eddy wykazali, że niewielka liczba komórek (około 100 do 1000) wciąż rośnie w ograniczonym stopniu na podłożu. Tam, gdzie liczba warzących komórek drożdży przekracza około 10 000, liczba rozwijających się kolonii zapewnia bezpośredni pomiar zanieczyszczenia dzikimi drożdżami3.

Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane podłoże przechowuj w temperaturze 2–8 ° C.

Wygląd
Pożywka odwodniona: biały, sypki proszek
Przygotowane medium: Lekki żel w kolorze słomy