FRASER BROTH BASE
Kod: CM0895
Wtórne selektywne podłoże wzbogacające diagnostyczne do izolacji Listeria spp. z okazów żywności i środowiska.
Typowa formuła * gm / litr
Pepton proteinowy 5.0
Tryptone 5.0
Proszek „Lab-Lemco” 5.0
Ekstrakt drożdżowy 5.0
Chlorek sodu 20,0
Wodorofosforan sodu 12,0
Dwuwodorofosforan potasu 1,35
Eskulina 1.0
Chlorek litu 3.0
pH 7,2 ± 0,2 przy 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
bez zmian przez dodanie suplementów
SUPLEMENT FRASEROWY
Kod: SR0156
Zawartość fiolki (każda fiolka wystarcza na 500 ml pożywki)
na fiolkę
na litr
Cytrynian żelazowo-amonowy
0,25 g
0,5 g
Kwas nalidiksowy
10,0 mg
20,0 mg
Chlorowodorek akryblawiny
12,5 mg
25,0 mg
Sposób użycia
Zawiesić 28,7 g w 500 ml wody destylowanej i dobrze wymieszać, aby całkowicie się rozpuścił. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Ochłodzić do temperatury poniżej 50 ° C i aseptycznie dodać zawartość jednej fiolki suplementu selektywnego Fraser (SR0156), odtworzonego zgodnie z instrukcją we wkładce produktu. Dobrze wymieszaj i rozprowadź w sterylnych pojemnikach.
SUPLEMENT POŁOWY FRASERA
Kod: SR0166
Selektywny suplement do pierwotnego wzbogacenia Listeria spp. z próbek żywności i próbek środowiskowych, gdy są używane z Fraser Broth
Zawartość fiolki
SR0166E
na fiolkę
SR0166G
na fiolkę
na litr
(przed dodaniem próbki)
Cytrynian żelazowo-amonowy
112,5 mg
1,125 g
500 mg
Kwas nalidiksowy
2,25 mg
22,5 mg
10,0 mg
Chlorowodorek akryblawiny
2,8125 mg
28,125 mg
12,5 mg
Sposób użycia
Zawiesić 12,9 g bulionu Fraser w 225 ml wody destylowanej i dobrze wymieszać do całkowitego rozpuszczenia Sterylizować w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Ochłodzić do temperatury poniżej 50 ° C i aseptycznie dodać zawartość jednej fiolki suplementu selektywnego Half Fraser SR0166E odtworzonego zgodnie z instrukcją we wkładce produktu. Dobrze wymieszaj i rozprowadź w sterylnych pojemnikach. Alternatywnie, aby uzyskać 2,25 litra, użyj 129,0 g CM0895 i 1 fiolki SR0166G.
Opis
Bulion Fraser jest modyfikacją bulionu wtórnego wzbogacania UVM USDA-FSIS (Departament Rolnictwa i Bezpieczeństwa Żywności Stanów Zjednoczonych) i opiera się na formule opisanej przez Frasera i Sperbera1. Zawiera cytrynian amonowo-żelazowy i chlorek litu. Czernienie podłoża jest domniemanym dowodem na obecność Listerii. Wbrew wczesnym wskazaniom nie można zakładać, że kultury, które nie czernieją, są wolne od Listerii. Wszystkie kultury wzbogacające w bulion Frasera należy poddać subkulturze do podłoża do posiewu.
Pożywka jest przeznaczona do izolacji Listeria spp. z próbek żywności i środowiska, gdy są stosowane jako wtórne medium wzbogacające w metodologii USDA-FSIS do izolacji Listeria. Ogólnie przyjmuje się, że dwustopniowa metoda wzbogacania USDA-FSIS wykorzystująca pierwotne i wtórne buliony wzbogacające UVM jest najbardziej odpowiednia do badania produktów mięsnych. Fraser Broth okazał się niezwykle dokładny w wykrywaniu Listeria spp. w próbkach żywności i środowisku 1,2.
Wszystkie Listeria spp. hydrolizuj eskulinę do eskuletyny. Eskuletyna reaguje z jonami żelazowymi, co powoduje czernienie. Inną możliwą zaletą dodatku cytrynianu amonowo-żelazowego jest to, że wykazano, że jony żelazowe zwiększają wzrost Listeria monocytogenes3. Chlorek litu jest zawarty w pożywce, aby zahamować wzrost enterokoków, które mogą również hydrolizować eskulinę. Należy zachować ostrożność przy stosowaniu bulionu Frasera z metodami sondy DNA, ponieważ wysoka zawartość soli w podłożu może mieć hamujący wpływ na wykrywanie4.
Bulion Half Fraser to modyfikacja bulionu Fraser, który zawiera połowę stężenia kwasu nalidyksowego i chlorowodorku akryflawiny, aby wspomóc regenerację stresowanych komórek. Bulion Half Fraser jest stosowany jako podstawowy bulion wzbogacający w metodologii ISO5 do wykrywania Listeria.
Technika
1. Zaszczepić 10 ml bulionu Frasera 0,1 ml bulionu pierwotnego wzbogacającego (tj. Bulionu wzbogacającego FDA lub UVM I), który inkubowano przez 20 do 24 godzin.
2. Inkubować w 35 ° C przez 26 ± 2 godziny w powietrzu.
3. Porównaj każdą zaszczepioną probówkę z zaszczepioną kontrolą na białym tle. Probówki, które przyciemniają się lub zmieniają kolor na czarny, należy poddać hodowli w podłożu Oxford Medium lub PALCAM Medium. Probówki zachowujące pierwotny żółty kolor należy również zaszczepić na podłożach do posiewów i potwierdzić, że są wolne od Listeria spp. przed odrzuceniem.
N.B. Pożywkę Fraser należy inkubować przez 26 ± 2 godziny, aby zapewnić co najmniej 24-godzinny okres inkubacji, aby umożliwić powstanie czarnego koloru.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przechowuj selektywny suplement w ciemności w temperaturze 2-8 ° C i użyj go przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowaną pożywkę można przechowywać do 2 tygodni w 2-8 ° C.
Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek
Przygotowane podłoże: roztwór w kolorze słomy
