Desoxycholate Citrate Agar (Hynes), pożywka sypka

Agar cytrynian dezoksycholanu (HYNES)

Kod: CM0227

Selektywne podłoże do izolacji organizmów Salmonella i Shigella.

Typowa formuła * gm / litr

Proszek „Lab-Lemco” 5.0

Pepton 5.0

Laktoza 10,0

Cytrynianu sodowego 8.5

Tiosiarczan sodu 5.4

Cytrynian żelazowo-amonowy 1.0

Dezoksycholan sodu 5.0

Neutralny czerwony 0,02

Agar 12,0

pH 7,3 ± 0,2 @ 25 ° C

 
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności

Sposób użycia
Zawiesić 52 g w 1 litrze wody destylowanej. Doprowadzić do wrzenia nad gazą i płomieniem, aby całkowicie się rozpuściły. Poruszać, aby zapobiec zwęgleniu. Ochłodzić do około 50 ° C i wlać do sterylnych szalek Petriego. Przed użyciem osusz powierzchnię agaru.
NINIEJSZY ŚRODEK JEST WRAŻLIWY NA CIEPŁO: UNIKAĆ NADMIERNEGO LUB PRZEDŁUŻONEGO OGRZEWANIA PODCZAS ODNOWIENIA NIE AUTOCLAVE AND REMELT.

Opis
Ulepszona pożywka oparta na modyfikacji Hynes1 pożywki Leifsons do izolacji salmonelli i shigelli.
Ulepszenie daje większe i liczniejsze kolonie gatunków Shigella, które można łatwo zebrać i zemulgować w soli fizjologicznej do testów aglutynacji szkiełek.

Dezoksycholanowo-cytrynowy agar (Hynes) jest bardziej selektywny niż dezoksycholanowo-cytrynowy agar CM0035. W szczególności agar cytrynian dezoksycholanu (Hynes) jest bardziej hamujący dla bakterii z grupy coli i Proteus.

Technika
Mocno zaszczepić podłoże kałem lub wymazami z odbytu, rozprowadzając część oryginalnego inokulum w celu uzyskania dobrze oddzielonych kolonii na pewnej części płytki. Inkubować przez 18–24 godzin w temperaturze 35 ° C. Jeśli organizmy są późnymi twórcami lub jeśli nie obserwuje się fermentorów innych niż laktoza, inkubuj przez kolejne 24 godziny.

Kolonie można pobierać bezpośrednio z podłoża do testów serologicznych i biochemicznych. Należy zauważyć, że Escherichia coli przeżywa na podłożu, nawet jeśli zwykle nie rośnie - dlatego czystość kolonialna powinna zostać ustalona przez subkulturę na zróżnicowanym, ale mniej hamującym podłożu, np. MacConkey Agar CM0007.

Charakterystyka kolonialna
(Po inkubacji w 35 ° C.)
Medium jest przezroczyste i jasnoróżowe. Organizmy fermentujące laktozę wytwarzają różowe kolonie i mogą być otoczone strefą wytrąconego kwasu dezoksycholowego, co jest spowodowane wytwarzaniem kwasu. Kolonie fermentorów innych niż laktoza są bezbarwne, a ze względu na ich alkaliczną reakcję otoczone są przezroczystą pomarańczowo-żółtą strefą pożywki.
Escherichia coli - Większość szczepów jest zahamowana, ale kilka szczepów, które rosną, wytwarza różowe pępowate kolonie o średnicy 1-2 mm, które mogą być otoczone strefą opadów.
Shigella sonnei - kolonie mają średnicę 1 mm po 18 godzinach inkubacji i 2 mm po 38 godzinach; są gładkie i początkowo bezbarwne, przy dalszej inkubacji stają się bladoróżowe z powodu późnej fermentacji laktozy.
Shigella flexneri - kolonie są bezbarwne i z wyglądu podobne do kolonii Shigella sonnei, ale często z wąskim płaskim obrzeżem wokół centralnej kopuły.
Salmonella paratyphi B - od średnicy 1 mm po 18 godzinach inkubacji do 2-4 mm drugiego dnia, gdy są lekko nieprzezroczyste, w kształcie kopuły, z centralną czarną kropką.
Salmonella typhi - średnica po 0,25-1 mm po 18 godzinach i jasnoróżowy, dzień później są płaskie, stożkowe, o średnicy 2 mm, bezbarwne i lekko nieprzezroczyste, często z centralną szarą kropką.
Inne kolonie Salmonella - podobne do kolonii Salmonella paratyphi B. Niepatogenne fermentory nielaktozowe, takie jak gatunki Proteus i Pseudomonas, rosną na pożywce i mogą wytwarzać kolonie, które ściśle symulują kolonie salmonelli lub Shigellae. Kolonie Proteus są często błyszczące (bardziej półprzezroczyste niż patogeny), z dużą środkową czarną kropką i „rybim” zapachem.

Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane płytki agarowe przechowywać w temperaturze 2–8 ° C.

Wygląd
Medium odwodnione: słomy / różowy, sypki proszek
Przygotowane medium: różowy żel