PODSTAWA AGARÓW CAMPYLOBACTER (KARMALI)
Kod: CM0935
Pożywka selektywna wolna od krwi do izolacji Campylobacter jejuni i Campylobacter coli po inkubacji w 42 ° C.
Typowa formuła * gm / litr
Baza agaru Columbia 39,0
Węgiel aktywny 4.0
Haemin 0,032
Końcowe pH 7,4 ± 0,2 przy 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Dodaj 21,5 g bazy agarowej Campylobacter (Karmali) do 500 ml wody destylowanej i doprowadź do wrzenia, aby się rozpuściła. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Schłodzić do 50 ° C. Aseptycznie dodaj 1 fiolkę Campylobacter Selective Supplement (Karmali) SR0167 lub zmodyfikowanego Karmali Selective Supplement SR0205, odtworzoną zgodnie z instrukcją. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego.
Opis
Pożywka Campylobacter (Karmali) jest oparta na preparacie opisanym przez Karmali i in. 1 i jest zalecana do izolacji Campylobacter jejuni i Campylobacter coli z próbek klinicznych.
Oryginalna pożywka Campylobacter bez krwi z linii produktów Oxoid zawiera pirogronian sodu w bazie agarowej. Campylobacter Medium (Karmali) włącza ten składnik do selektywnego suplementu. Oryginalna pożywka zawiera również dezoksycholan sodu do hamowania organizmów Gram-dodatnich, podczas gdy w pożywce Campylobacter (Karmali) supresja Gram-dodatnia jest osiągana przez włączenie wankomycyny. Zmodyfikowany selektywny suplement karmali SR0205 oferuje alternatywę wolną od cykloheksymidu poprzez zastosowanie amfoterycyny B jako środka przeciwgrzybiczego3.
Szczepy Campylobacter jejuni wytwarzają szare, wilgotne, płasko rozprzestrzeniające się kolonie po 42 godzinach inkubacji w 42 ° C.
Jeśli płytki są badane po raz pierwszy po 24 godzinach inkubacji, należy je natychmiast przeczytać i szybko przywrócić do atmosfery o zmniejszonej zawartości tlenu, aby zapewnić ciągłą żywotność szczepów wrażliwych na tlen.
Przy 42 ° C selektywność wzrasta, a wzrost jest szybszy, ale szczepy nieterofilowe nie będą rosły, np. Campylobacter fetus subsp. płód.
Kolonie mają tendencję do roju, gdy początkowo są izolowane z próbek klinicznych.
Technika
1. Przygotuj płytki Campylobacter Selective Medium (Karmali) zgodnie z instrukcją użycia.
2. Zemulguj około 0,5 g próbki w 5 ml sterylnej 0,1% wody peptonowej, aby uzyskać rozcieńczenie 1:10.
3. Zaszczepić na selektywnym podłożu za pomocą wacików zakończonych bawełną, aby powstały pojedyncze izolowane kolonie.
4. Inkubuj płytki w atmosferze składającej się z około 5-6% tlenu, 10% dwutlenku węgla i 84-85% azotu przez 48 godzin w 42 ° C. Można to najlepiej osiągnąć za pomocą zestawu do generowania gazu oksydowego dla postaci Campylobacter BR0056 w połączeniu ze słoikiem anaerobowym Oxoid i aktywnym katalizatorem BR0042. W przypadku słoików o mniejszej pojemności (2,5 litra) użyj zestawu do generowania gazu tlenkowego dla Campylobatures BR0060. Alternatywnie użyj CampyGen CN0025 lub CN0035. CampyGen nie wymaga dodawania wody ani katalizatora.
5. Zbadaj płytki i potwierdź typowe kolonie jak Campylobacter jejuni lub Campylobacter coli. Prosty schemat różnicowania gatunków Campylobacter opisali Skirrow i Benjamin2.
Warunki przechowywania i okres ważności
Baza agarowa Campylobacter (Karmali) powinna być przechowywana szczelnie zamknięta w oryginalnym pojemniku w chłodnym, suchym miejscu, z dala od jasnego światła. Po przechowywaniu w temperaturze 10–30 ° C podłoże pozostanie stabilne do daty ważności wydrukowanej na etykiecie.
Wygląd
Pożywka odwodniona: czarny, sypki proszek
Przygotowane podłoże: czarny żel
