Tryptone Water, pożywka sypka

WODA TRYPTONOWA

Kod: CM0087

Płynne środowisko do produkcji indolu przez mikroorganizmy.

Typowa formuła * gm / litr

Tryptone 10,0

Chlorek sodu 5.0

pH 7,5 ± 0,2 przy 25 ° C

* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności

Sposób użycia
Rozpuść 15 g w 1 litrze wody destylowanej i rozprowadź w końcowych pojemnikach. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut.

Opis
Woda tryptonowa jest dobrym substratem do produkcji indolu ze względu na wysoką zawartość tryptofanu i do tego celu jest bardziej niezawodna niż woda peptonowa. Zdolność niektórych organizmów do rozkładania aminokwasu tryptofanu z tworzeniem indolu jest ważną właściwością stosowaną do klasyfikacji i identyfikacji bakterii 1,2.

Technika

Odczynnik Kovaca:

paradimetyloaminobenzaldehyd 5 gramów

alkohol amylowy 75 ml

stężony kwas solny 25 ml

1. Zaszczepić probówki wodą tryptonową i inkubować przez 24–48 godzin w temperaturze 35 ° C.
2. Dodaj 0,2 ml odczynnika Kovaca i wstrząśnij. Pozostaw na 10 minut i obserwuj wynik.
Ciemnoczerwony kolor w powierzchniowej warstwie alkoholu amylowego stanowi pozytywny test indolowy; brak zmiany pierwotnego koloru odczynnika stanowi test negatywny.

Odczynnik Ehrlicha:

paradimetyloaminobenzaldehyd 4 gramów

absolutny alkohol 380 ml

stężony kwas solny 80 ml

1. Zaszczepić probówki wodą tryptonową i inkubować przez 24–48 godzin w temperaturze 35 ° C.
2. Wyciągnij niewielką część kultury i dodaj równą objętość odczynnika. Wstrząśnij miksturą i odstaw na kilka minut; kolor róży wskazuje na obecność indolu. Jeśli obecny jest indol, tę zmianę koloru można przyspieszyć przez dodanie nasyconego roztworu nadsiarczanu potasu.

Alternatywnie, ekstrahuj indol, wstrząsając kulturami z 1 ml eteru, odstaw mieszaninę na kilka minut, a następnie dodaj 0,5 ml odczynnika Ehrlicha.

Inkubacja w 44 ° C przez 24 godziny ma szczególną zaletę w wykrywaniu Escherichia coli, ponieważ jest to jedyny organizm obecny w wodzie zdolny do wytwarzania indolu w tej temperaturze 3.

Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane podłoże przechowuj w temperaturze pokojowej.

Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek
Przygotowane podłoże: roztwór o jasnym słomie