AGAR SELEKTYWNY LISTERII (FORMULACJA OXFORD)
Kod: CM0856
Selektywne i diagnostyczne podłoże do wykrywania Listeria monocytogenes, przygotowane z Listeria Selective Agar Base i Listeria Selective Selective SR0140 lub zmodyfikowane Listeria Selective Supplement (Oxford) SR0206
Typowa formuła * gm / litr
Baza agaru z krwią Columbia 39,0
Eskulina 1.0
Cytrynian żelazowo-amonowy 0,5
Chlorek litu 15,0
pH 7,0 ± 0,2 w 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
SUPLEMENT WYBORU LISTERII (FORMULACJA OXFORD)
Kod: SR0140
Zawartość fiolki (każda fiolka wystarcza na 500 ml pożywki)
na fiolkę na litr
Cykloheksimid 200 mg 400 mg
Siarczan kolistyny 10,0 mg 20,0 mg
Acriflawina 2,5 mg 5,0 mg
Cefotetan 1,0 mg 2,0 mg
Fosfomycyna 5,0 mg 10,0 mg
ZMODYFIKOWANY SUPLEMENT LISTERII (OXFORD)
Kod: SR0206
Zawartość fiolki (każda fiolka wystarcza na 500 ml pożywki)
na fiolkę/ na litr
Amfoterycyna B 5,0 m 10,0 mg
Siarczan kolistyny 10,0 mg 20,0 mg
Acriflawina 2,5 mg 5,0 mg
Cefotetan 1,0 mg 2,0 mg
Fosfomycyna 5,0 mg 10,0 mg
Sposób użycia
Zawiesić 27,75 bazy Seleria Selective Agar Base (preparat Oxford) w 500 ml wody destylowanej. Delikatnie zagotuj, aby się rozpuścił. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Ochłodzić do 50 ° C i aseptycznie dodać zawartość jednej fiolki Selekcyjnego suplementu selektywnego Listeria (preparat Oxford) lub zmodyfikowanego suplementu selektywnego Listeria (Oxford) SR0206, SR0140 rozpuszczonego w 5 ml 70% etanolu. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego.
Opis
Zakażenie przenoszone przez żywność przez Listeria monocytogenes wzbudziło zwiększone zainteresowanie wykryciem tego organizmu w żywności, środowisku i patologicznych okazach zarówno od ludzi, jak i zwierząt.
Większość zakażeń u dorosłych ludzi jest bezobjawowa i powoduje nosicielstwo jelit, pochwy i szyjki macicy. Zakażenie podczas ciąży może powodować aborcję, przedwczesne porody i zakażenie noworodka. U kobiet z niewyjaśnionym nawracającym poronieniem, przedwczesnym porodem lub śmiercią płodu należy rozważyć możliwość listeriozy. Organizm należy poszukiwać w posiewach krwi i wacikach narządów płciowych1.
Najczęstszym objawem klinicznym zarówno u dorosłych, jak iu noworodków jest zapalenie opon mózgowych. Rzadziej występują szeroko rozpowszechnione zakażenia, ropnie, podostre bakteryjne zapalenie wsierdzia i zakażenia oportunistyczne u pacjentów z obniżoną odpornością.
Ptaki, ryby i inne zwierzęta są podatne na zakażenie Listerią. Ma to szczególne znaczenie w przypadku domowych zwierząt gospodarskich. W Republice Federalnej Niemiec zgłaszanie listeriozy u zwierząt jest obowiązkowe, a przepisy dotyczące kontroli mięsa w tym samym kraju wymagają badania na Listeria ze względu na jej znaczenie dla higieny mięsa.
Listeria monocytogenes jest bardzo rozpowszechniona w środowisku. Odnotowano izolację z mleka2,3, sera4, ścieków i wód rzecznych5 oraz kiszonki6. Ponieważ Listeria jest tak rozpowszechnionym źródłem infekcji, jest ich wiele. Wiązano z niegotowanymi warzywami; epizod związany ze spożyciem surówka Coleslaw 7 związany był z kapustą z gospodarstwa wykorzystującego nawóz ściekowy. W przypadku wybuchów wywołanych przez produkty mleczne bydło z zapaleniem sutka może być źródłem organizmu. Ogromne znaczenie dla weterynarzy ma znaczny wzrost liczby owiec zakażonych objawiających się aborcją lub zapaleniem mózgu, głównie ze względu na zmieniające się praktyki w produkcji kiszonki.
Zdolność do izolowania organizmu była w przeszłości utrudniona z powodu braku skutecznego selektywnego podłoża, ponieważ Listeria monocytogenes może być łatwo i całkowicie zarośnięta przez konkurującą florę.
Selektywna pożywka Listeria (preparat Oxford) oparta jest na preparacie opisanym przez Curtisa i in. 9 i jest zalecana do wykrywania Listeria monocytogenes z próbek klinicznych i próbek żywności.
Medium wykorzystuje
(i) selektywne składniki hamujące: chlorek litu, akryflawina, siarczan kolistyny, cefotetan, cykloheksimid lub amfoterycyna B i fosfomycyna;
(ii) układ wskaźnikowy eskulina i żelazo żelazne do izolacji lub różnicowania Listeria monocytogenes.
Listeria monocytogenes hydrolizuje eskulinę, tworząc czarne strefy wokół kolonii z powodu tworzenia związków fenolowych czarnego żelaza pochodzących z aglukonu. Bakterie Gram-ujemne są całkowicie hamowane. Większość niechcianych gatunków Gram-dodatnich jest tłumionych, ale niektóre szczepy enterokoków słabo rosną i wykazują słabą reakcję aesculin, zwykle po 40 godzinach inkubacji. Niektóre gronkowce mogą rosnąć jako kolonie pozbawione eskuliny.
Typowe kolonie Listeria monocytogenes są prawie zawsze widoczne po 24 godzinach, ale inkubację należy kontynuować przez kolejne 24 godziny w celu wykrycia wolno rosnących szczepów.
Techniki izolacji różnią się w zależności od autora i badanego materiału10,11. Dla wszystkich próbek wykazano, że selektywne wzbogacanie i wzbogacanie na zimno znacznie zwiększa wskaźniki izolacji 12,13,14. Skuteczność Listeria Selective Medium (Oxford Formulation) została potwierdzona
