Brillant Green Bile 2% Broth, pożywka sypka

BRILLIANT GREEN BILE (2%) BRAT
Kod: CM0031

To podłoże służy do wykrywania lub potwierdzania obecności członków grupy coli-aerogenes; genialna zielona zawartość tłumi beztlenowe fermentatory laktozy, takie jak Clostridium perfringens, a pożywka jest zalecana do testu potwierdzającego Escherichia coli w temperaturze 44 ° C.

Typowa formuła * gm / litr

Pepton 10,0

Laktoza 10,0

Wół żółć (oczyszczony) 20,0

Brilliant Green 0,0133

pH 7,4 ± 0,2 w 25 ° C

* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności

Sposób użycia:
Rozpuścić 40 g w 1 litrze wody destylowanej. Dobrze wymieszaj, rozprowadź w pojemnikach wyposażonych w probówki Durhama i sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut.

Nie autoklawować medium podwójnego stregnth. Alternatywną procedurą jest podgrzewanie rozpuszczonego bulionu w 100 ° C przez 30 minut1.

Opis
Pożywkę tę opracowali Durham i Schoenlein2 w celu selektywnego odzyskiwania organizmów z grupy coli-aerogenes. Żółć i genialne zielone składniki hamują organizmy Gram-dodatnie, podczas gdy grupa coli-aerogenes jest rozpoznawana przez szybkie tworzenie się gazu podczas fermentacji laktozy3. Ważne jest, aby czynniki hamujące w pożywce były zrównoważone ze składnikami odżywczymi i mineralnymi, aby zarodniki Clostridium i Bacillus nie dawały fałszywie dodatnich reakcji w ośrodku, tj. Tworzenia gazu. Rosół Brilliant Green Bile jest stosowany w analizach wody, nabiału i żywności4,5,6,7,8.

Dodanie 4-metylumbelliferylo-β-D-glukuronidu (MUG) (BR0071) do tej pożywki poprawi wykrywanie Escherichia coli. Zobacz MUG Reagent (BR0071) w Biological Reagents w celu uzyskania dalszych szczegółów.

Technika
Aby wskazać obecność Escherichia coli, brylantowy zielony bulion żółciowy inkubuje się w temperaturze 44 ± 1 ° C przez 48 godzin. Zmętnienie w bulionie i wytwarzanie gazu w odwróconej rurce są znakami pozytywnymi. Test produkcji indolu w temperaturze 44 ° C jest również przeprowadzany w wodzie tryptonowej (CM0087) lub wodzie peptonowej (CM0009) w celu potwierdzenia tożsamości Escherichia coli.

W testach kontroli roślin wodnych, w których stosuje się <1 ml do 10 ml objętości wody, ważne jest, aby nie przedawkować medium. W ten sposób 1 ml lub mniej objętości wody można dodać do 10 ml bulionu Brilliant Green Bile. W przypadku 10 ml objętości wody należy użyć bulionu Brilliant Green Bile o podwójnej mocy w równych objętościach. Po inkubacji w temperaturze 35 ° C przez 48 godzin tworzenie gazu przypuszczalnie wskazuje na organizmy coli-aerogenes.

Maceraty spożywcze rozcieńcza się dziesiętnie i dodaje do bulionu w proporcji 1:10. Bulion o podwójnej sile może być stosowany do próbek o dużej objętości.
Inkubacja jest przeprowadzana; w 44 ° C przez 48 godzin w celu wykrycia Escherichia coli; w 32 ° C przez 25–48 godzin w celu wykrycia organizmów coli-aerogenes1,10; lub w 4 ° C przez 10 dni w celu wykrycia psychotroficznych organizmów coli.

Pożywka staje się mętna i żółtozielona, ​​gdy bakterie rosną, a gdy towarzyszy jej obfite tworzenie się gazu, istnieje domniemany dowód na obecność organizmów coli-aerogenes. Testy potwierdzające powinny zostać przeprowadzone.

Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przechowuj przygotowane probówki z bulionem w temperaturze 2-8 ° C.

Wygląd
Pożywka odwodniona: jasnozielony, sypki proszek
Przygotowane podłoże: zielony roztwór