AGAR EKSTRAKT Z OKSYTETRACYKLINY-GLUKOZY-DROŻDŻY (AGAR OGYE)
Kod: CM0545
Do selektywnego oznaczania pleśni i drożdży.
Typowa formuła * gm / litr
Ekstrakt drożdżowy 5.0
Glukoza 20,0
Agar 12,0
pH 7,6 † ± 0,2 @ 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
pH pożywki bez dodatku
SELEKTYWNY SUPLEMENT ŻYTA OKSYTETRACYKLINY
Kod: SR0073
Zawartość fiolki (każda fiolka wystarcza na 500 ml pożywki)
na fiolkę/ na litr
Oksytetracyklina (w buforowanej bazie)
50 mg
100 mg
Uwaga: odtworzony suplement jest wrażliwy na światło. Zaleca się natychmiastowe dodanie roztworu do przygotowanej bazy agarowej. Nieprzestrzeganie tego może spowodować zmętnienie roztworu.
Sposób użycia
Zawiesić 18,5 g w 500 ml wody destylowanej i delikatnie doprowadzić do wrzenia, aby całkowicie się rozpuściły. Sterylizuj w autoklawie w temperaturze 115 ° C przez 10 minut. Pozostawić medium do ostygnięcia do 50 ° C i aseptycznie dodać zawartość jednej fiolki z selektywnym suplementem oksytetracykliny GYE (SR0073) odtworzonym zgodnie z zaleceniami. Dokładnie wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego. PH tego podłoża powinno wynosić 7,0 ± 0,2 @ 25 ° C.
Opis
Agar z oksytetracykliną-glukozą i ekstraktem drożdżowym jest zalecany do selekcji i liczenia drożdży i pleśni z produktów spożywczych1,2. Pożywka wykorzystująca oksytetracyklinę jako środek wybiórczy oparta jest na preparacie opracowanym przez Mossel i in. 3, który stwierdził, że zastosowanie tego antybiotyku w pożywce o neutralnym pH daje zwiększoną liczbę drożdży i pleśni z różnych produktów spożywczych w porównaniu z pożywki, które polegały na niskim pH w celu zahamowania wzrostu bakterii. Fizycznie obciążone komórki drożdży dają większą liczbę pożywek, które zależą od antybiotyków o szerokim spektrum działania niż od niskiego pH dla selektywności4. We wcześniejszych pracach Mossel5 stwierdził, że agar z ekstraktem z drożdży glukozowych był tak korzystny jako podstawowy ośrodek, jak agar „Mycophil”, później zalecany przez Sharf6. Stwierdzono, że dodanie oksytetracykliny sprawia, że agar z ekstraktem z drożdży glukozowych jest bardziej selektywny niż agar z „mykofilem” poprzez hamowanie wzrostu bakterii mlekowych, z których większość rośnie przy kwasowym pH tej drugiej pożywki.
Wybór odpowiedniego podłoża do liczenia drożdży i pleśni jest w dużej mierze zależny od charakteru badanych środków spożywczych i organizmów na nich występujących7. Agar z ekstraktem z oksytetracykliny-glukozy-drożdży pozostaje bakteriostatyczny po zaszczepieniu nie większym niż 1 ml 10-1 rozcieńczenia żywności, a następnie inkubacji przez nie więcej niż 5 dni w temperaturze 25 ° C, jak to jest zwyczajowo praktykowane w mikologii żywności2.
Do izolacji drożdży psychrotroficznych z schłodzonej żywności białkowej skuteczne jest połączenie oksytetracykliny i gentamycyny8.
Bardzo białkowa żywność i wyższe temperatury inkubacji około 35 ° C wymagane dla niektórych organizmów dezaktywują oksytetracyklinę, umożliwiając wzrost pręcików Gram-dodatnich i Gram-ujemnych. Do takich zastosowań agar z różno-bengalskim chloramfenikolem (CM0549) może być podstawiony lub baza agarowa z dichloran-glicerolem (DG18) (CM0729).
Technika
Przenieść 1 ml podwielokrotności serii odpowiednich rozcieńczeń próbki do pustych szalek Petriego o średnicy 9 cm. Do każdego z rozcieńczeń stosuje się dwie szalki. Dodaj około 15 ml pożywki przygotowanej zgodnie z opisem. Wymieszaj delikatnie, obracając płytki trzy razy w prawo i trzy razy w lewo.
Inkubować przez 5 dni w 22 ± 2 ° C z szalkami Petriego do góry nogami, sprawdzając, czy po 2 dniach nie pojawiła się grzybnia powietrzna.
Policz liczbę kolonii na płytkach zawierających 50-100 kolonii po 5 dniach lub na dowolnych policzalnych płytkach, gdy grzybnia powietrzna grozi utratą dalszych odczytów po 2 dniach. Obliczenia uzyskane dla każdego rozcieńczenia powinny być podobne na obu płytkach.
Oblicz liczbę drożdży lub pleśni na 1 g lub 1 ml, mnożąc liczbę kolonii przez współczynnik rozcieńczenia.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane podłoże przechowuj w temperaturze 2–8 ° C.
Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek
Przygotowane medium: żel w kolorze słomy
